DOI:10.12131/20220226文章编号：2095−0780−（2023）02−0150−11•研究简报•光裸星虫SERCA基因克隆及在卵母细胞中的表达分析苏泳霖1，钟如卓1，郭志诚1，王庆恒1,2,31.广东海洋大学水产学院，广东湛江5240882.广东省海水养殖生物育种工程实验室，广东湛江5240883.广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室，广东湛江524088摘要：细胞内钙离子(Ca2+)浓度的变化是介导卵母细胞成熟的重要因素。肌质网/内质网Ca2+-ATP酶(Sarco/endoplasmicreticulumcalciumadenosinetriphosphatase,SERCA)属P型ATP酶家族成员，是细胞内Ca2+转运的重要调控蛋白。前期转录组分析显示，光裸星虫(Sipunculusnudus)SERCA(Sn-SERCA)的表达量在卵母细胞发育过程中差异显著，为进一步研究SERCA在卵母细胞不同发育阶段中的作用，利用RACE技术得到Sn-SERCAcDNA全长，采用实时荧光定量PCR检测Sn-SERCA在各卵母细胞发育时期的相对表达量。结果表明，Sn-SERCA全长为3840bp，5'非编码区(UTR)为196bp，3'UTR为581bp，开放阅读框3060bp，编码1020个氨基酸，Sn-SERCA具有P型ATP酶家族进行催化反应所需的两个保守基序“TGES”和“DKTGT”。多序列比对、Motif分析及三级结构预测结果显示SERCA同源蛋白具有较高保守性。系统进化树分析表明Sn-SERCA与粉正蚓(Lumbricusrubellus)、鸭嘴海豆芽(Lingulaanatine)等无脊椎动物同源蛋白序列聚为一支。荧光定量结果显示：卵母细胞在体腔液中发育时，Sn-SERCA在卵黄旺盛合成后期高表达；当卵母细胞进入肾管后，Sn-SERCA的表达量大幅上升，显著高于其他时期(P<0.05)。结合前期卵母细胞发育的超微结构观察，研究结果表明Sn-SERCA在光裸星虫卵母细胞的卵黄积累和生发泡破裂发生过程中起重要作用。关键词：光裸星虫；SERCA基因；卵母细胞；表达分析中图分类号：S917.4文献标志码：A开放科学（资源服务）标识码（OSID）：CloningandexpressionanalysisofSERCAgeneofSipunculusnudusinoocytesSUYonglin1,ZHONGRuzhuo1,GUOZhicheng1,WANGQingheng1,2,31.FisheriesCollege,GuangdongOceanUniversity,Zhanjiang524088,China2.GuangdongProvincialEngineeringLaboratoryforMaricultureOrganismBreeding,Zhanjiang524088,China3.GuangdongProvincialKeyLaboratoryofAquaticAnimalDiseaseControlandHealthyCulture,Zhanjiang524088,ChinaAbstract:Thechangeofintracellularcalcium(Ca2+)concentrationisanimportantfactorinoocytematuration.Asamemberofth...
