53卷南方农业学报·3266·收稿日期：2022-03-07基金项目：国家自然科学基金项目（32160825）；广西研究生教育创新计划项目（YCSW2021031）通讯作者：陈樱（1980-），https://orcid.org/0000-0001-6720-353X，博士，教授，主要从事宠物病毒性疾病研究工作，E-mail：yingchen@gxu.edu.cn第一作者：曾昊（1997-），https://orcid.org/0000-0003-3783-5995，研究方向为宠物流感病毒分子生物学，E-mail：1918302038@st.gxu.edu.cn犬源H9N2亚型流感病毒的遗传进化及其致病性分析曾昊1，何剑桥1，崔柏杨1，郭嘉宁1，郭金凡1，周华波2，韦祖樟1，欧阳康1，黄伟坚1，陈樱1*（1广西动物疫病预防与控制重点实验室/广西大学动物科学技术学院，广西南宁530004；2南宁市华波宠物医院，广西南宁530004）摘要：【目的】明确犬源H9N2亚型流感病毒的分子变异特征及致病性，为今后探究流感病毒的禽—犬跨种传播机制提供科学依据。【方法】从流浪犬中分离H9N2亚型流感病毒，利用RT-PCR扩增其8个基因节段进行BLAST同源比对，然后基于国内外的22株参考毒株进行遗传进化分析，并通过小鼠滴鼻感染试验评估分离毒株的致病性。【结果】从采集的393份犬鼻拭子样品中分离获得1株H9N2亚型流感病毒，命名为A/canine/Guangxi/LZ11/2018（简写为LZ11）。分离毒株LZ11为三重组毒株，其中，HA、NA和NS基因属于BJ/94类谱系，PB2和M基因属于G1类谱系，PB1、PA和NP基因属于F/98类谱系；病毒基因组成属于近年我国广泛流行的S基因型。分离毒株LZ11的HA蛋白在第324~331位存在1个裂解位点（PSRSSR↓GL），符合低致病性流感病毒的特征；HA蛋白还出现226Q→L突变，具有优先结合人类α-2,6唾液酸受体的能力；NA蛋白在119E、151D、276E、292R和294N未发生突变，但M2蛋白出现31S→N突变，说明分离毒株LZ11仍对神经氨酸酶抑制剂敏感，但已对金刚烷胺类药物产生耐药性；聚合酶蛋白出现多个哺乳动物适应性相关的氨基酸位点突变，包括PB2蛋白的292I→V、PB1蛋白的368I→V及PA蛋白的409S→N和356K→R。分离毒株LZ11虽然未引起小鼠出现典型的临床症状，但可在肺脏和上鼻窦有效复制，病毒滴度分别为3.82和5.98lgPFU/mL。【结论】分离获得的犬源H9N2亚型流感病毒属于近年流行的S基因型，其8个基因节段分属于3种谱系（BJ/94类谱系、G1类谱系和F/98类谱系），且存在多个哺乳动物适应性相关氨基酸位点突变，具备感染哺乳动物的分子特征，可在小鼠脏器内有效复制。鉴于人类与宠物犬的密切关系，今后应加强对犬...
