53第25卷第2期2023年2月辽宁中医药大学学报JOURNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFTCMVol.25No.2Feb.，2023祛风养心方通过SIRT3-AMPK介导自噬抑制AngⅡ诱导H9c2心肌细胞肥大机制研究史默怡，王明珠，周训杰（上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，上海200437）基金项目：国家自然科学基金青年科学基金项目（81904160）作者简介：史默怡（1987-），女，河北枣强人，主治医师，博士，研究方向：中西医结合防治心血管内科疾病的基础研究。通讯作者：周训杰（1980-），男，江苏南京人，副主任医师，博士，研究方向：中西医结合防治心血管疾病。E-mail：kenshin2000@163.com。摘要：目的探究祛风养心方通过SIRT3-AMPK通路介导自噬抑制AngⅡ诱导H9c2心肌细胞肥大的作用机制。方法用慢病毒感染H9c2心肌细胞构建SIRT3低表达稳定株。用AngⅡ诱导H9c2心肌细胞肥大模型，制备含药血清。实验组分为4组：①10%空白血清（blank）+Lv-NC；②AngⅡ+10%空白血清（blank）+Lv-NC；③AngⅡ+10%QFYX含药血清+Lv-NC；④AngⅡ+10%QFYX含药血清+Lv-shSIRT3。用鬼笔环肽染色评价细胞面积，WesternBlot方法检测ANP、BNP、ACTα1、LC3-II、Beclin1、P62、P-AMPK、P-mTOR蛋白的表达含量。结果与blank+Lv-NC组比较，AngⅡ+Lv-NC组H9c2心肌细胞肥大，心肌肥厚基因蛋白的表达上调[ANP、BNP（P<0.01），ACTα1（P<0.05）]，自噬代表基因Beclin1、LC3-II、P62的表达显著上升（P<0.01），SIRT3的表达下降（P<0.05），P-AMPK下降（P<0.01），P-mTOR上升（P<0.01）。与AngⅡ+Lv-NC组比较，AngⅡ+QFYX+Lv-NC组心肌肥大不显著，肥厚基因ANP、BNP、ACTα1、自噬代表基因Beclin1、LC3-II、P62的表达显著下降[ANP、BNP、ACTα1、Beclin1（P<0.01），LC3-II、P62（P<0.05）]，SIRT3的表达上升（P<0.01），P-AMPK上升（P<0.01），P-mTOR下降（P<0.01），与AngⅡ+QFYX+Lv-NC组比较，AngⅡ+QFYX+Lv-shSIRT3组肥厚基因表达增强[ANP、BNP（P<0.01），ACTα1（P<0.05）]，SIRT3处于低表达水平（P<0.01），自噬代表基因的表达升高[Beclin1、P62（P<0.01），LC3-II（P<0.05）]，P-AMPK下降（P<0.01），P-mTOR上升（P<0.01）。结论祛风养心方可以通过改善自噬，通畅自噬流，抑制AngⅡ诱导H9c2心肌细胞肥大，这种保护作用是通过促进SIRT3的表达介导AMPK-mTOR通路实现的。关键词：SIRT3；AMPK；祛风养心方；自噬；细胞肥大中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1673-842X(2023)02-0053-06ResearchontheMec...
