赖宝春，姚锦爱.蜜柚间座壳黑点病菌（Diaporthecitri）LAMP可视化检测技术的建立[J].福建农业学报，2022，37（11）：1470−1475.LAIBC,YAOJN.EstablishmentofaLAMPAssayforRapidDetectingDiaporthecitrionPomelo[J].FujianJournalofAgriculturalSciences，2022，37（11）：1470−1475.蜜柚间座壳黑点病菌（Diaporthecitri）LAMP可视化检测技术的建立赖宝春1，姚锦爱2*（1.漳州市农业科学研究所，福建漳州363005；2.福建省作物有害生物监测与治理重点实验室/福建省作物有害生物绿色防控工程研究中心/福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013）摘要：【目的】建立一种蜜柚间座壳黑点病菌快速、简便、灵敏的LAMP（Loopmediatedisothermalamplification）可视化检测方法，在植株表现症状之前或初期实现病原菌的监测，为病害的早期监测、诊断及防治提供依据。【方法】以EF-1a（Elongationfactor-1α）基因序列为靶序列，设计了一套LAMP特异性引物；以蜜柚黑点病菌DNA为模板，优化反应温度和反应时间，建立LAMP检测反应体系，开展特异性和灵敏度验证及田间病株检测。【结果】建立的LAMP反应体系可特异有效地检测出蜜柚黑点病菌。该体系最佳反应温度、反应时间分别为65℃和60min。灵敏度验证结果表明，LAMP检测最小质量浓度为10fg·μL−1。采用LAMP法对15份疑似蜜柚黑点病田间样本进行快速检测，检出率为100%。【结论】本研究建立的蜜柚间座壳黑点病菌LAMP快速检测方法不仅特异性强、灵敏度高，且检测结果可视，可用于田间黑点病菌的实时监测和快速检测。关键词：蜜柚；黑点病；间座壳菌；环介导等温核酸扩增技术；检测中图分类号：S436文献标志码：A文章编号：1008-0384（2022）11−1470−06EstablishmentofaLAMPAssayforRapidDetectingDiaporthecitrionPomeloLAIBaochun1,YAOJinai2*（1.ZhangzhouInstituteofAgriculturalSciences,Zhangzhou,Fujian363005,China;2.FujianKeyLaboratoryforMonitoringandIntegratedManagementofCropPests/FujianEngineeringResearchCenterforGreenPestManagement,InstituteofPlantProtection,FujianAcademyofAgriculturalSciences,Fuzhou,Fujian350013,China）Abstract:【Objective】Aloop-mediatedisothermalamplification(LAMP)methodforvisual,rapid,andaccuratedetectionofDiaporthecitrionpomelosinearlystageofblackspotdiseasewasdeveloped.【Method】Basedontheelongationfactor-1α(EF-1α)sequenceofD....
