2022年11月摘要：为了探讨绵羊microRNAs(miRNAs)是否靶向TNF3′UTR区域，以及初步确定miRNAs靶向其基因的区域，笔者以绵羊miRNAs为研究对象，利用PCR方法克隆TNF3′UTR(3′非翻译区)，应用mi-Randa软件分析miRNAs靶向TNF3′UTR基因的具体区域和结合能力。结果表明，成功克隆TNF3′UTR，大小为500bp；miR-125b、let-7b和let-7c同时靶向TNF3′UTR基因，表明宿主miRNAs具有潜在的靶向抑制TNF3′UTR基因表达的能力，初步明确miRNAs靶向TNF3′UTR基因的具体区域，为进一步探讨miRNAs调节TNF3′UTR表达提供了基础资料。关键词：TNF；microRNAs；miRanda；3′非翻译区MicroRNAs(miRNAs)是一种长18~25nt的非编码RNA，广泛参与宿主基因表达调控[1]。miRNAs往往通过靶向目的基因mRNA的3′非编码区(3′UntranslatedRegion，3′UTR)和基因编码区(Codingsequence，CDS)发挥调节作用。miRNAs将Arg-onaute(AGO)蛋白复合物募集到互补的靶mRNA上，从而导致mRNA的翻译抑制或降解，进而调控基因表达[2-3]。研究表明，宿主miRNAs不但能调控宿主基因的表达，还参与众多生物学过程[4]。肿瘤坏死因子(TNF)是一种可以杀伤肿瘤细胞的细胞因子，可以引起机体产生抗感染的炎症反应，对机体的免疫系统起到调控作用[5]。肿瘤坏死因子分为TNF-α和TNF-β2种类型。TNF-α主要由巨噬细胞分泌，而TNF-β来源于T淋巴细胞，他们的结构不同，但是生物学功能极为相似，目前将TNF称作TNF-α[5]。有研究表明，绵羊肺炎支原体感染(MO)可诱导产生高水平的TNF-α。然而，TNF-α产生的机制尚不明确[6]。据报道，糖尿病体内和体外miRNA-497治疗降低了代表性的促炎细胞因子，例如TNF-α、IL-1β和IL-6[7]。研究人员在骨关节炎疾病模型中发现，过表达miR-93增强了细胞活力，改善了细胞凋亡并减弱了炎症反应，其中TNF-α、IL-1β和IL-6分泌量绵羊microRNAs靶向TNF3′UTR基因区域分析曹鑫艳1魏立翔1高之煜1刘良波1张辉1闫卫疆2肖非2孙雪梅2盛金良1张彦兵1,2*孙延鸣1*1.石河子大学动物科技学院(新疆石河子832003)2.新疆泰昆集团股份有限公司(新疆昌吉831203)中图分类号：S826，Q343.1文献标识码：B文章编号：1002-2996(2022)11-0032-04AnalysisofSheepmicroRNAsTargettheRegionofTNF3′UTRGeneCAOXin-yan1，WEILi-xiang1，GAOZhi-yu1，LIULiang-bo1，ZHANGHui1，YANWei-jiang2，XIAOFei2，SUNXue-mei2，SHENGJin-liang1，ZHANGYan-bing1，2*，SUNYan-ming1*(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology，S...
