林而舒，卓玉琛，陈斌，等.鳗鲡疱疹病毒与鳗鲡圆环病毒双重PCR检测方法的建立[J].福建农业学报，2022，37（11）：1394−1399.LINES,ZHUOYC,CHENB,etal.EstablishmentandapplicationofduplexPCRdetectionsystembetweenAnguillidherpesvirusandEelcircovirus[J].FujianJournalofAgriculturalSciences，2022，37（11）：1394−1399.鳗鲡疱疹病毒与鳗鲡圆环病毒双重PCR检测方法的建立林而舒，卓玉琛，陈斌，林煜，钟全福，樊海平，曾占壮（福建省淡水水产研究所，福建福州350002）摘要：【目的】建立能同时检测鳗鲡疱疹病毒（Anguillidherpesvirus，AHV）与鳗鲡圆环病毒（Eelcircovirus，EeCV）的双重PCR法。【方法】优选PCR引物组合，建立鳗鲡疱疹病毒与鳗鲡圆环病毒的双重PCR检测方法，探究双重PCR扩增条件，并检验该方法的特异性、灵敏性和临床样品检测效果。【结果】双重PCR法同时扩增出鳗鲡疱疹病毒690bp和鳗鲡圆环病毒338bp特异性片段，与猪圆环病毒（Porcinecircovirus）、鸭圆环病毒（Duckcircovirus）、锦鲤疱疹病毒（Koiherpesvirus）和鲤疱疹病毒（Cyprinidherpesvirus）的核酸不发生扩增反应。鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒重组质粒标准品的最低全检出量为5.0×10-4μg·mL-1。用所建立的双重PCR方法对50份临床病鳗进行检验，其中鳗鲡疱疹病毒的感染率为16%，鳗鲡圆环病毒的感染率为68%，共感染率为8%。该感染率与单一PCR检测结果完全一致。【结论】建立的鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒双重PCR检测法不仅特异性强、灵敏度高、重复性好，而且临床应用效果佳，为鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒的快速检测提供了有效的技术支持。关键词：鳗鲡疱疹病毒；鳗鲡圆环病毒；双重PCR；检测方法中图分类号：S941文献标志码：A文章编号：1008-0384（2022）11−1394−06EstablishmentandapplicationofduplexPCRdetectionsystembetweenAnguillidherpesvirusandEelcircovirusLINErshu,ZHUOYuchen,CHENBin,LINYu,ZHONGQuanfu,FANHaiping,ZENGZhanzhuang（FreshwaterFisheriesResearchInstituteofFujianProvince,Fuzhou,Fujian350002,China）Abstract:【Objective】TheaimofthepresentstudywastoestablishaduplexPCRmethodfordetectionofAnguillidherpesvirusandEelcircovirus.【Method】RoutinePCRprimerswerepreferredtooptimizetheamplificationconditionsandtestthespecificityandsensitivityofthemethod.Atthesametime,thesickeelofsuspectedcasescollectedfro...
