浙江农业学报ActaAgriculturaeZhejiangensis,2023,35(1):90-102http://www.zjnyxb.cn熊兴伟,王艺琴,田怀志,等.基于转录组测序解析南瓜子叶黄化的分子机理[J].浙江农业学报,2023,35(1):90-102.DOI:10.3969/j.issn.1004-1524.2023.01.10收稿日期:2022-03-30基金项目:贵州省科技计划(黔科合成果〔2021〕一般063,黔科合成果〔2020〕1Z002号);国家重点研发计划(2021YFD1100301)作者简介:熊兴伟(1996—),男,侗族,贵州石阡人,硕士研究生,主要从事蔬菜生理生态与生物技术研究。E-mail:gdxxwei@163.com*通信作者,耿广东,E-mail:genggd213@163.com基于转录组测序解析南瓜子叶黄化的分子机理熊兴伟,王艺琴,田怀志,张素勤,耿广东*(贵州大学农学院,贵州贵阳550025)摘要:为研究南瓜叶色黄化突变的机制,挖掘黄化相关关键基因,试验以南瓜自然黄化突变体为试材,通过高通量RNA测序(RNA-seq)对苗期子叶进行转录组分析。结果表明:从检测的26445个表达基因中鉴定出12687个差异表达基因(DEGs),包括6444个上调基因,6243个下调基因;其中2321个DEGs是转录因子编码基因。选取14个与光合色素密切相关的DEGs进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析,发现它们的基因表达水平与转录组测序结果一致。经KEGG富集分析,发现卟啉和叶绿素(Chl)生物合成、光系统Ⅰ、光系统Ⅱ、光合作用-天线蛋白、电子传递和F型ATP酶相关基因的表达显著下调。谷氨酰-tRNA还原酶、镁离子螯合酶、叶绿素a加氧酶基因异常表达,血红素代谢相关基因表达上调抑制了Chl合成;β-胡萝卜素3-羟基酶促进了类胡萝卜素生成;另外,光合作用过程受阻也反馈抑制Chl合成,Chl合成受阻和类胡萝卜素合成受促导致南瓜叶色黄化。研究结果为南瓜黄化突变的分子机制提供了新的见解,为关键基因功能分析和南瓜育种奠定了基础。关键词:南瓜;黄化突变体;叶绿素;转录组;基因表达中图分类号:S642.1文献标志码:A文章编号:1004-1524(2023)01-0090-13Molecularmechanismsofchlorophyll-reducedcotyledonbasedontranscriptomesequencinginpumpkinXIONGXingwei,WANGYiqin,TIANHuaizhi,ZHANGSuqin,GENGGuangdong*(CollegeofAgriculture,GuizhouUniversity,Guiyang550025,China)Abstract:Inordertoexplorethemechanismsofchlorophyll-reducedmutationandexcavateitskeygenes,pumpkinnaturalchlorophyll-reducedseedlingwasusedastestmaterial,andthetranscriptomeofthecotyledonwasanalyzedbyhig...