动物布氏杆菌病血清学诊断1887年英国军医Bruce首先从死于“马耳他热”的英国士兵的脾脏中分离出羊种布氏菌。布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌属(Brucella)的细菌侵入机体,引起传染-变态反应性的人畜共患传染病。布鲁氏菌病简称布病。布鲁氏菌简称为布氏菌布鲁氏菌病适用范围本标准规定了动物布鲁氏菌病的诊断技术。本规定的虎红平板凝集试验、乳牛全乳环状试验适用于家畜布病田间筛选试验和乳牛场布病的监测及诊断泌乳母牛布病的初筛试验;试管凝集试验和补体结合试验适用于诊断羊种、牛种和猪种布病感染的家畜。本标准规定的试管凝集试验不适用于犬种和绵羊副睾种布病感染家畜的检疫。布鲁氏菌病检验方法:依据标准GB/T18646-2002布氏杆菌分离培养布菌培养:琼脂培养基、血琼脂培养基,厌氧培养。布菌鉴定:菌落形态观察、涂片、染色、镜检布氏菌,诊断血清凝集试验。试管增菌布氏菌特异的油滴样菌落布氏菌特异的油滴样菌落图2血平皿布氏菌菌落图1琼脂布鲁氏菌菌落布氏菌革兰染色镜检布病血清学检验12布病虎红平板凝集实验布病虎红平板凝集实验布病试管凝集实验布病试管凝集实验布病虎红平板凝集实验材料准备:抗原、标准阳性血清、阴性血清由青岛易邦生物科技公司提供,按说明用。受检血清应新鲜,无明显蛋白凝块,无溶血和无腐败气味。准备一块洁净玻璃板,画成若干个4厘米小格或虎红平板凝集试验玻璃板、陶瓷板。用移液器,适于滴加0.03ml(即300μl)液体。原理:利用酸性带色的抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性,主要检查血清中的IgG类抗体。操作方法在实验薄片上标记好位置滴加0.03ml的抗原。图1.在每一个标记好的布病抗原上滴加0.03ml的待检血清,用移液器吸头搅混均匀。每次试验应设阴性、阳性血清对照图1判定结果前最好将抗原与血清混合物摇动几下.如图3.在阴性、阳性血清对照成立的条件下,方可对被检血清进行判定。被检血清在4分钟内出现肉眼可见的凝集现象者判为阳性(+),无凝集现象,呈均匀粉红色者判为阴性(—)。每份被检血清在规定时间内出现凝集反应者判为阳性,不出现凝集为阴性反应。结果判定阳性阳性阴性阴性注意事项本抗原适合于大数量田间检疫和筛选诊断试验用。本试验出现阳性反应的动物,需经试管凝集试验或其它辅助试验方可定性。本抗原使用前应充分摇匀,方可使用。凡本抗原出现污染或摇不散的凝集块者不得使用。布鲁氏菌病试管...