流式细胞仪检测凋亡和细胞周期等应用.pptVIP免费

流式细胞术流式细胞术FlowCytomFlowCytometryetry（（FCMFCM））什么是流式细胞仪●流式细胞仪实物BDFACSVantageBD-Calibur1.1.发展历史发展历史1934Moldavan1934Moldavan1973Steinkamp1973Steinkamp一、概述一、概述2.2.定义：对在高速流动的鞘液包括下对特异荧定义：对在高速流动的鞘液包括下对特异荧光标记的细胞、粒子进行光标记的细胞、粒子进行分析和分选分析和分选的技术的技术..3.3.特点特点测量速度快，每秒钟能测数千个乃至上万个测量速度快，每秒钟能测数千个乃至上万个细胞细胞可进行多参数测量可进行多参数测量在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离出来，即分选技术。出来，即分选技术。凡是能被荧光素标记的细胞或颗粒都可用流式细胞仪检测。前提这种荧光素能被流式细胞仪所配置的激光光源激发在生物检测技术中流式细胞仪是不可多得的一机多用的仪器。4.应用范围二、流式细胞仪的工作原理和基本结构待测细胞以单个细胞的悬液，经特异性荧光染料染色，放入样品管，吸入流动室。流动室充满鞘液，作用：约束样品在喷嘴中心，防止样品靠近喷孔壁堵塞喷孔。细胞排成单列由喷嘴中心喷出，形成细胞液柱。液柱与激光束相交，细胞上的荧光染料被激发产生荧光。荧光信号变成电信号输出到计算机，软件分析。基本结构流动室和液流系统；流动室和液流系统；激光源和光学系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统。计算机和分析系统。三、流式细胞仪可检测到的细胞参数非荧光信号非荧光信号颗粒度细胞大小=前向角散射光（FSC）细胞相对大小及其表面积=侧向角散射光（SSC）细胞颗粒度及细胞内细胞器的相对复杂性血液涂片外周全血细胞散射光双参数点图荧光信号荧光信号荧光强度（荧光强度（FLFL）：细胞上的荧光染料被激光激发后发射出）：细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光，不同的荧光染料其发射波长不同。的荧光，不同的荧光染料其发射波长不同。有荧光标记的细胞与无荧光标记的区分开来（阴阳）有荧光标记的细胞与无荧光标记的区分开来（阴阳）高高FLFL细胞与低细胞与低FLFL细胞区分开来（强弱）细胞区分开来（强弱）一般的流式细胞仪只装有一个激光光源（一般的流式细胞仪只装有一个激光光源（488nm488nm），可测出），可测出三个三个FLFL，即，即FL1FL1、、FL2FL2、、FL3FL3，大型的流式细胞仪装有，大型的流式细胞仪装...