第一篇：农大网校本科毕业论文

目

录

摘 要............................................................................................2 关键词..........................................................................................2

1养老保险制度的现状及发展历程................................................2 1.1我国农村养老保险的现状............................................................2 1.2我国农村养老保险制度的发展历程...........................................3 2完善农村社会养老保险的特征及意义.......................................3 2.1农村社会养老保险的特征............................................................3 2.2完善农村养老保险制度的意义....................................................................4 3农村社会养老保险存在的问题及原因.......................................5 3.1农民思想观念的局限性................................................................5 3.2参保率低，且保障水平过低..........................................................................5 3.3农村社会养老保险制度本身存在缺陷....................................................6 3.4我国农村社会养老保险中政府责任缺损...................................6 4完善我国农村社会养老保险的对策............................................7 4.1强化农村社会养老保险模式的制度建设...............................................7 4.2农村社会养老保险制度中政府责任的重新定位...............................7 4.3加快农村社会养老保险的立法进程...........................................8 4.4建立多层次的农村社会养老体系...............................................................9

后记.....................................................................................................................................9 参考文献.................................................................................................9

农村养老保险制度研究

摘 要:农村养老保险制度的建立和完善,关系到我国新农村的发展,关系到和谐社会和谐农村的建设,具有非常深远的意义。然而,目前的农村养老制度并没有达到与之发展相适应的理想效果。本文力求通过分析养老保险制度的发展现状,对其在发展过程中存在的挑战和问题提出对应举措和本人的一点建议。

关键词:农村 养老保险 制度研究

农村社会保障始终是我国社会保障制度体系建设的重要组成部分，农村的社会保障制度的推行与完善，密切关系着占总人口约70％的农村人口目前和未来的生活质量，随着我国改革开放以及经济建设的逐步推进，农村养老保险制度的滞后已经严重制约了社会的进步与发展，所以，建立并完善我国农村社会保障制度，尤其是农村社会养老保险制度的建立和完善尤为重要。

1、养老保险制度的现状及发展历程

随着人们生活水平和医疗条件的提高，我国人后的寿命逐渐增长，开始步入老龄化社会。老年人口的增多，让养老成为了一个社会问题。相比城市，传统的家庭养老模式逐渐瓦解，随着我国农村城镇化的迅速发展，失去赖以生存的土地等问题使得农村养老问题更为严重。要保障农村老龄人安度晚年，就必须有一个可行的农村养老保险制度。研究解决好农民的社会养老保险问题，不仅是保障农民权利的客观需要，也是农村政治、经济、社会能否稳定、持续发展的前提。建立健全农村社会养老保险制度成为了我国必须解决和迫切解决的问题。

1．1我国农村养老保险的现状

目前经济形态下，我国农村除了少数发达地区之外，绝大部分地区的基本养老模式还是“家庭养老＋社会救助供养”，这种状况基本反映了我国农村目前生产力发展水平和社会经济发展水平。而其就现行的社会保障制度来看，农村的社会养老保险是个缺失的部分，政府在建设和完善农村社会养老保险方面存在着缺位和越位的现象，这就要从政府自身的责任来谈。我国目前的农村养老方式集中在其一，家庭养老是农村养老的主要方式；其二社会养老为补充形式。根据国务院的决定，在农村经济发达和比较发达地区推行农村社会养老保险试点。其主要做法是，根据农民自愿、在政府组织引导下，从农村和农民的实际出发，保险资金以农民个人交纳为主，集体补助为辅，国家予以政策扶持，实行储备积累的模式，建立个人养老保险基金帐户，根据积累的资金总额和预期的平均领取年限确定养老金的领取标准，交纳标准和支付标准实行多档次。养老保险基金以县为单位统一核算，统一管理。1.2我国农村养老保险制度的发展历程

从1986年我国开始在农村建立社会养老保险制度，此后的农村社会养老保险制度的建设和发展大致走过以下5个发展阶段：

（1）探索和试点阶段（1986-1992）

1986年，民政部根据国家“七五”计划的要求，开始在经济发达地区进行农保工作探索。1991年6月，根据《国务院关于企业职工养老保险改革的决定》，民政部负责农村养老保险制度的改革，并选择山东烟台等五个县市进行建立县级农保制度的试点。

（2）推广阶段（1993-1998）

1992年民政部正式下发《县级农村养老保险基本方案》，俗称“老农保”。老农保面向的是年龄为20—60周岁且为非城镇户口、不由国家供应商品粮的农村人口。到1998年底，全国有31个省、自治区、直辖市的2123个县（市）和65％的乡镇开展了农村社会养老保险工作，参加社会养老保险的农村人口有8025万人，积累基金166.2亿元。

（3）衰退阶段（1998-2002）

在一些因素的共同影响下，这一时期全国大部分地区农村社会养老保险工作出现了参保人数下降、基金运作难度加大等困难。农村社会养老保险的参保人数由1998年的8025万人减少至2002年的5428万人，参保率也降到了14.9%。在部分地区的农村，社会保险更是陷入停办状态。

（4）逐步恢复阶段（2003-2008）

2006年，劳动和社会保障部决定选择北京市大兴区、山东省招远市、菏泽市牡丹区等8个县市区，启动了新型农村社会养老保险的试点工作。从2007年开始，一种全新的农村养老保险政策—新型农村社会养老保险政策开始在部分省市区实行。

（5）新的探索阶段（2009年至今）

根据党的十七大和十七届三中全会精神，国务院决定从2009年在全国10%的县（市、区）开展新型农村社会养老保险试点工作。

2、完善农村社会养老保险的特征及意义

2.1农村社会养老保险的特征

我国的社会养老保险制度分为城镇养老保险制度和农村养老保险制度。农村养老保险制度的建立虽迟于城镇养老保险制度，但其在我国也已经有20多年的发展历史，到如今，已发展成为新型农村养老保险制度。

概括说，当前我国新型农村社会养老保险的特点主要表现在一下几个方面：（1）政府引导与农民自愿结合

我国农村经济发展很不平衡，全国各地经济发展水平的差异大，因此我国农村社会养老保险采取政府组织引导和农民自愿相结合的工作方法，对收入在全国平均水平以下、贫困线以上的农民采取自愿性原则，但是鼓励他们参加，政府给予支持。（2）筹资结构特点

我国农村社会养老保险的基金筹集办法以个人缴费为主，集体补助为辅，国家予以政策扶持。但是集体补助只能是辅助筹资渠道，因为只有在极少数经济比较发达的地区，集体企业才可能为农民提供一部分的补助。（3）支付结构特点

我国农村社会养老保险采用储备积累的支付模式，即建立个人帐户，农民个人缴费和集体补助全部记在个人名下，个人领取的养老金数目由个人缴费多少和积累时间长短决定。（4）统一管理

我国农村社会养老保险制度对农村的务农、经商等各类从业人员实行统一管理，为全国各地提供新型农村养老保险的最低标准和一般的运行机制。统一的管理模式这样, 为新型农村养老保险在全国农村的真正建立了基础。

2.2完善农村养老保险制度的意义

所着我国经济的不断发展，人们的生活水平的不断提高，特别是农村生活水平的大幅度提升，人们越来越重视养老问题，而随着我国已步入老龄化社会以后，建立健全社会保障体系，完善农村养老保险制度就越发显得紧迫。（1）完善新农保制度是缩小城乡差距的必然要求

我国城镇和农村在发展中差距慢慢开始出现，并且越来越大。就公平角度而言，农村养老保险制度应该与城镇养老保险相统一。然而，自我国改革开放以来，城乡差距就已存在，农村至今仍做不到事事与城镇相同，就养老保险制度而言，我国城镇的养老保险已经步入正轨，而在建立农村社会养老保险制度方面虽然进行了许多探索，但农村的社会养老保险发展明显滞后于城市。并且在短时期内无法形成城乡一体化，为此应该尽快建立符合中国国情的新农保制度，弥补制度安排的缺失，完善社会保障体系。这是缩小城乡差距的必然要求。

（2）完善新农保制度有利于刺激农民消费需求

为了保证国民经济持续、稳定的发展，我国实施了以扩大内需为目的的积极财政政策。由于农民占我国人口总数的62%以上，农民消费能力不足，己成为制约经济快速增长的主要因素之一。农村现实情况表明，虽然随着经济体制改革的不断深入，农民的收入有所增加，生活环境和生活质量有所改善，但是农村经济生活中的不确定因素也随之增加，农民将有限的收入储蓄起来，用以购买“安全”，以遭遇年老和疾病等风险。因此，完善新农保制度，可在一定程度上消除农民的后顾之忧稳定农民心理预期，激发农村潜在的购买力，从而促进中国经济继续保持高速增长。（3）完善农保制度是应对人口老龄化挑战的有效手段

随着生活品质的提高，人类平均寿命越来越长，随之带来的是人口老龄化的问题。2009年，我国60岁以上人口有1.67亿，占人口总数比重达12.5％，其中农村人口约占三分之二。由于工业化、城镇化进程的加快，人均土地资源越来越少，中国农民靠家庭养老和土地养老的传统模式越来越难以为继，农村老年贫困化的现象日益突出。建立新农保制度，给予农村老年人普遍的生活保障，是应对农村人口老龄化问题的根本之策。

3、农村社会养老保险存在的问题及原因

尽管新农保针对老农保存在的一些问题进行了修正及创新，新农保也是更具有科学性、可行性和合理性的制度，但是其在实践的过程中依旧出现了或将面临一些不容忽视的问题，因此，只有根据实际情况不断优化，才能保证我国新型农村社会养老保险制度的可持续发展。目前，我国农村社会养老保险存在的问题及原因主要有：

3.1 农民思想观念的局限性

几千年来自给自足小农经济社会下的低下生产力，将农民束缚在土地上，农民一旦进入老年，丧失劳动力，只能由子女来赡养，因此在很长一段时间内，我国农村的养老方式一直以家庭养老为主，“养儿防老”思想占主体地位；同时，家庭本位文化使家庭的赡养功能最大限度的发挥，于是“养儿防老”的养老方式被延续至今。另外农民对农村社会养老保险知之甚少，加上我国关于农村社会养老保险制度的政策法规不健全、管理方式落后，因而农民的参保意识淡薄。

3.2 参保率低，且保障水平过低

我国农村社会养老保险的参保率低。2000年，农村60岁以上老年人口领取退休金比例为8.2%，而依靠家庭养老的比例高达86.2%。2003年到2005年期间，我国农村社会养老保险的参保人数分别为5428万人、5378万人 和5489万人，增长比率分别为-0.62%、-0.92% 和2.06%，一度有负增长。我国农村社会养老保险的保障水平低。《基本方案》颁布后，农民交纳保险费时根据自己的实际情况分2元至20元10个档次缴费，而大多数农民都选择了保费最低的2元/月的投保档次。在不考虑通货膨胀等因素的情况下，农民在10年后只可以领到4.7元/月的养老金，这点钱对养老几乎起不到什么作用。

3.3 农村社会养老保险制度本身存在缺陷

（1）筹资模式不合理

我国农村社会养老保险的基金筹集办法仅对个人缴费标准作了较为明确的规定，而集体补助和国家扶持形同虚设。保险费主要由农民自己承担，个人积累制的支付模式是与社会保险的特征相悖的。在我国，集体补助和国家扶持的形同虚设大大降低了农民参保积极性。（2）资金运行模式不合理

建立个人帐户，农民个人缴费和集体补助全部记投保人个人账户下，贯彻“自助为主，互济为辅”的原则，这样的个人积累制是与社会保障的本质是不一致的。个人账户制的资金运行模式再加上集体补助和国家扶持的形同虚设，这实质上是一种低效率的商业保险，长此以往，会有害于社会公平和安定。

（3）财务模式不合理

我国农村社会养老保险的参保对象为20周岁到60周岁的公民，领取养老金年龄限制在60周岁以后，财务上实行完全积累的模式。这种模式对农村接近60周岁和60周岁以上的农民的参保是不利的。前者面临个人资金积累储备不足，通常会选择不参保；”后者则彻底地被排除在外，面临着缺乏养老保险的困境。

3.4 我国农村社会养老保险中政府责任缺损

（1）制度供给不足

十七大之前，我国政府一直避开建立农村社会养老保险制度的责任，总是将农村社会养老保险制度作为实现其政治、经济目标的附属物，农村社会养老保险制度一直没有被作为社会政策的重要组成部分。1992年的《基本方案》实际上只能算是一个部门文件或一个法规,对农村社会养老保险制度的建立和实施的法律效力是有限的。我国农村养老保险制度在制度层面上形成了制度需求与制度供给的巨大落差。

（2）财政支持不力

我国农村社会养老保险在资金筹集上要坚持以“个人缴纳为主，集体补助为辅,国家给予政策扶持”的原则，目前农村社会养老保险发展缓慢的根本原因追其重要原因是政府财政支持不力。农村养老保险基金来源主要依靠农民自己，村集体给予适量的补贴，政府扶持方面形同虚设。而大多数村集体的经济实力有限,没有提供补助的能力。

(3)监管职能履行不到位

政府监督职能履行不到位，主要体现在两方面：第一，现行管理体制不集中。劳动保障部负责农村社会养老保险、卫生部负责农村合作医疗、民政部负责救济、抚恤制度以及最低生活保障制度，各部门各自为政，管理体制相当分散。第二，在实践农村社会保障事业时，由于多部门争办农村社会养老保险，部门利益矛盾、挪用救灾扶贫款项、社会保险基金管理不规范等问题相继出现。这些问题都是由于政府监督职能履行不到位引起的。

4、完善我国农村社会养老保险的对策

4.1强化农村社会养老保险模式的制度建设

（1）资金筹集和缴费标准

国务院2009年9月的《关于开展新型农村社会养老保险试点的指导意见》中提出新型农村社会养老保险的基金筹集来源由个人缴费、集体补助、政府补贴三部分构成。第一部分为个人缴费。参加新型农村社会养老保险的农民缴纳养老保险费的标准目前设为每年100元、200元、300元、400元、500元5个档次，各个地方政府可以根据当地实际经济发展水平增设缴费档次。参保人自主选择档次缴费，多缴多得。第二个部分是集体补助。村民委员会召开民主村民会议商议敲定补助标准，政府鼓励有条件的村集体、其他经济组织、社会公益组织、个人等等对参保人缴费给予补助和资助。第三部分是政府补贴。首先政府对符合领取条件的参保人全额支付基础养老金。

（2）资金运行模式设计

农村基本养老保险的资金运采用社会统筹与个人账户相结合的模式。每个参保人都有属于自己终身记录的养老保险个人账户。这个个人账户的资金来源中包括个人、集体、经济及公益组织、有条件的个人以及地方政府。统筹方面，根据目前的经济发展水平和社会保障制度的现状，应当先实行东部有条件的地区统筹，再渐渐上升到全国范围的统筹。

（3）财务模式设计

农村社会养老保险的财务模式上采用现收现付与积累并存的部分积累制。这主要考虑到前部分提到的两部分人群的养老问题。农村接近60周岁和60周岁以上的农民的养老基金来源于社会统筹账户的一部分，实行现收现付。60周岁以上的农民直接按一定的标准期限计算派发养老金。另外，农村接近60周岁年龄的农民且差距在十六岁之间的人群的年龄最为参保前的缴费期限，再按全部年限计算派发养老金。若干年后社会统筹账户完成对农村接近60周岁和60周岁以上的农民补贴任务后，社会统筹账户在本质上变成公共积累账户，有利于农民收入增加和社会稳定。

4.2农村社会养老保险制度中政府责任的重新定位

（1）明确政府的价值理念 价值理念会深刻影响政府责任范围和履行责任，因此，明确政府的价值理念是必要的，具体要做到以下几点：第一个价值理念是社会保险是所有公民的基本权利，要保证广大农民都能享有社会养老保险要求政府必须承担起自身责任。第二个价值理念是公平优先,兼顾效率。效率是公平的基本前提，公平是效率的保证。实现了效率才能促进经济的发展，实现了公平才能促进社会稳定。第三个理念是民主参与理念。政府应该集思广益，吸纳农民的建议，组织讨论会，通过民主会议商议出的内容最为指导意见，整个过程中全面贯彻规范性和民主性。

（2）强化政府的财政责任

政府的财政支持是农村社会养老保险制度得以顺利实施的首要责任。从发达国家的经验中可以发现发达国家的政府都为投保人提供了一定的资金支持，大部分国家财政资金支持都在整个基金的三分之二以上，从而促进了农村社会养老保险制度的发展和完善。而我国近年来实行分税制体制，中央财政收入保持着稳步提高的状态，政府应当加大中央财政的转移支付力度，实现农村社会保障稳步进步。因此，中央财政应当对给予农村社会养老保险制度财力支持，保证农民的合法权益，促进社会的稳定。

（3）完善政府的管理监督责任

政府必须担起建立健全农村社会养老保险管理监督体系的责任，具体要做到以下一点：第一，大力发展生产力,促进经济发展，为农村社会保障建立强大的物质基础。第二，倡导公正理念，建设社会主义道德文明。社会公正，人人有责。政府要在全社会范围内倡导社会公正，对社会成员进行公正理念的教育，培养其公平意识，使公正公平理念深入人心。第三，政府要履行好自己的社会整合职能。当前，整个社会处于各种社会要素分化重组的转型期，政府的社会整合功能做得怎样关系到整个社会的凝聚力。

4.3加快农村社会养老保险的立法进程

目前，我国仅有的两个文件办法——国务院制定的指导意见》和民政部门策划的基本方案》，前者为政策性法规，后者为实施策略，不属于法律范畴，政府与农民没有建立稳定持久的契约关系。地方政府颁布的一些实施法案也都是在这两个文件稍加修改的基础上形成的，所以说，我国的农村社会养老保险制度要有自己的法律保障，以法律条文的形式对参保对象、资金筹集、监督管理、支付运行标准、基金运营以及各级政府部门的责任等等内容都要加以规定，改变现在农村社会养老保险各方面的随意性。各级地方政府也要根据当地的经济发展水平和人民收入情况、思想状况等等，在遵循国家法律的基础上，制定符合本地发展特点和发展要求的农村社会养老保险制度实施办法。当中央和地方的法律条文都形成时，我国农村社会养老保险制度才会有良好的法律环境加以维护促进促进成长直至完善。4.4建立多层次的农村社会养老体系

我国是最大的发展中国家，城乡经济发展差距大，区域经济发展差距大，完善的农村社会养老保险制度真正地建立和完善，需要经历很长时间去探索实践。09年9月以来新型农村社会养老保险在东部地区的积极试点，政府的扶持力度很大，并采用一定的强制措施，从财政和政策上给予了很大的支持，从而使新型农村社会养老保险工作能够顺利开展。另外，在中部及西部一些经济欠发达地区，当前应该采用家庭养老为主、个人集体社会养老为辅的形式，等欠发达地区的经济水平发展起来，农民收入增加，有实行农村社会养老保险制度的物质基础的前提下，增大个人养老、集体养老和社会养老的比例，最后过渡到社会养老为主的养老保险体系。

后记

总之，加快建立新型农村养老保险制度是我国农村现代化进程中社会进步的一个必然要求。我国地区发展不平衡，城乡差距较大，各地经济发展水平、经济承受能力及农民的保险意识等方面都存在诸多差异，因此建立起完善的新农村社会养老保险制度是个庞大的系统工程。因此，新农保政策将会面临一系列的问题。所以，在大力推进新型农村养老保险试点工作时，应在总结过去的经验和教训的基础上，不断发现新制度实施过程中存在的问题与不足，并依据不同试点地区的实际情况不断的加以完善和健全，为新型农村社会养老保险制度的普及和推广提供重要的典型示范作用。参考文献：

[1] 米红.嘉兴市新型农村社会养老保险模式选择及制度方案设计[M].2006.[2] 朱庆仙.我国农村社会养老保险制度的问题及对策[J].农业经济出版社.2006.[3]杨长富.浅议建立和完善我国农村社会养老保险制度[J].辽宁对外经贸学院.2008.[4]杨立雄.新型农村养老保险制度及其改革思路[J].重庆社会科学.2009（12）.[5]李曌.苏南地区农村养老保险现状调查与思考[J].农业经济,2009.6.[6]曹云清，李斯.和谐社会下新型农村养老保险制度的思考[J].经济与管理.2009（3）.[7]梁晓青.新型农村社会养老保险制度建设探析[J].理论与观察.2010（2）.[8]崔付荣.完善新型农村养老保险制度的几点建议[J].黑龙江史志.2010.（15）.[9]张海伟.新旧农保转轨瓶颈因素规避刍议[J].华南师范大学.2010.[10]杨超.郭林.创新东部地区农村社会养老保险模式的探讨[J].河北大学.[11]徐庚乾.江苏新农保制度建设观察[J].江苏省人力资源和社会保障厅.2010.[12]韩俊江.完善我国新型农村社会养老保险制度研究[J].Social Security Studies No.2 2010.[13]苑梅.中国农村社会养老保险制度研究文献综述[J].《石家庄经济学院学报》.2010年04期.[14]中国国家统计局．统计数据.[15]中华人民共和国人力资源和社会保障部.

第二篇：农大毕业论文

关于成人专升本应届毕业生

毕业照相及撰写毕业论文等有关事项的通知

学校：内蒙古农业大学 层次： 专升本 专业：____________

同学：

根据发证院校教学计划要求，为全面检查学员学习及教学成果，专升本学员须在毕业前提交毕业论文，现将毕业论文撰写要求、书写格式及毕业照相等相关事宜通知如下：

一、毕业论文:

（一）毕业论文撰写要求：

1、要求学员紧紧围绕所学专业自拟题目，选题要结合生产实际和工作实际。

2、论文字数在4000字以上。

3、学员要独立完成，抄袭的论文不予通过。

（二）毕业论文书写格式要求： 1.统一用A4纸，激光打印。2.打印格式：

①论文标题：统一使用小二号字，黑体，居中。

②院校、专业、年级打在标题下面，小四号字，楷体。③作者署名：小四号字、楷体、居中、名字之间空两格。

④内容摘要：字数为300字左右，使用小四号楷体，出现在首页标题下面。

⑤关键词：内容摘要下空一行打印“关键词”三字，其后为关键词（15个汉字左右），“关 键词”三字用四号黑体，关键词用小四号宋体，每一个关键词之间空一格。

⑥正文：统一使用五号字，宋体。

⑦“参考文献”四个字用四号黑体，参考文献内容用五号字宋体。⑧页码：居中。

3.书写份数：一式两份。（不得复印）

（三）毕业论文要在2012年5月9-11日提交给班主任老师.同时正式填写毕业登记表。

二、毕业照相及相关费用等事项：

1、应届毕业生请于2011年3月23日上午;9:00-12:00 进行毕业照相，届时请准时到教学站找班主任报到，同时缴纳毕业证工本费及新华社照相费：100元。

2、毕业考试、毕业论文评审及答辩费：350元（毕业考试及论文答辩时间另行通知）。

3、专升本毕业生于2012年5月9-11日将专科证《教育部学历证书电子注册备案表》和毕业证复印件（A4纸）各一份交到内蒙古对外商务专修学院。

三、学员因自身原因未能按要求及时上交论文和专科毕业证有关证件而影响办理毕业手续，后果自负，学院概不负责。

内蒙古对外商务专修学院

二○一二年三月十日

关于成人专科应届毕业生

毕业照相及撰写毕业设计等有关事项的通知

学校：内蒙古农业大学 层次： 专科 专业：_____________

___ 同学：

根据发证院校教学计划要求，为全面检查学员学习及教学成果，理工类专科学员须在毕业前提交毕业设计，现将毕业设计撰写要求、书写格式及毕业照相等有关事宜通知如下：

一、关于毕业设计：

（一）毕业设计撰写要求：

1、要求学员紧紧围绕所学专业自拟题目，选题要结合生产实际和工作实际。

2、论文字数在2500字以上。

3、学员要独立完成，抄袭的论文不予通过。

（二）毕业设计书写格式要求： 1.统一用A4纸，激光打印。2.打印格式：

①论文标题：统一使用小二号字，黑体，居中。②院校、专业、年级打在标题下面，小四号字，楷体。③作者署名：小四号字、楷体、居中、名字之间空两格。

④内容摘要：字数为200字左右，使用小四号楷体，出现在首页标题下面。

⑤关键词：内容摘要下空一行打印“关键词”三字，其后为关键词（15个汉字左右），“关 键词”三字用四号黑体，关键词用小四号宋体，每一个关键词之间空一格。

⑥正文：统一使用五号字，宋体。

⑦“参考文献”四个字用四号黑体，参考文献内容用五号字宋体。⑧页码：居中。

3.书写份数：一式两份。（不得复印）

（三）毕业设计要在2012年5月9-11日提交给班主任老师.同时正式填写毕业登记表。

二、毕业照相及相关费用等事项：

1、应届毕业生将于2012年3月23日上午：9:00-12:00进行毕业照相，届时请准时到教学站找班主任报到，同时缴纳新华社照相费及毕业证工本费：100元。

2、毕业考试、毕业设计评审费：180元（毕业考试时间另行通知）。

3、学员因自身原因未能按时上交“毕业设计”而影响办理毕业手续，后果自负，学院概不负责。

内蒙古对外商务专修学院

二○一二年三月十日

第三篇：农大毕业论文

编号：

中国农业大学现代远程教育

毕业论文（设计）

论文题目 丙烯酰胺测定方法的研究进展

学 生 张进 指导教师 曹振彩 专 业 食品质量与安全 层 次 专升本 批 次 122 学 号 w110501122010 学习中心 中国农业大学网络教育学院 工作单位 药用植物研究所

2014年 8 月

中国农业大学网络教育学院制

I

独 创 性 声 明

本人声明所呈交的毕业论文（设计）是我个人进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文（设计）中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在毕业论文（设计）中作了明确的说明并表示了谢意。

学生签名：张进

时间：

2014 年 8月 8 日

关于论文（设计）使用授权的说明

本人完全了解《中国农业大学网络教育学院本、专科毕业论文（设计）工作条例（暂行规定）》对：“成绩为优秀毕业论文（设计），网络教育学院将有权选取部分论文（设计）全文汇编成集或者在网上公开发布。如因著作权发生纠纷，由学生本人负责”完全认可，并同意中国农业大学网络教育学院可以以不同方式在不同媒体上发表、传播毕业论文（设计）的全部或部分内容。中国农业大学网络教育学院有权保留送交论文（设计）的复印件和磁盘，允许论文（设计）被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编论文（设计）。

[保密的毕业论文（设计）在解密后应遵守此协议]

学生签名：张进

时间：2014 年月 8 日

密级：（请注明密级及保密期限）

II

摘要

2002年4月，瑞典国家食品管理局(NFA)和斯德哥尔摩大学的科研小组发现，许多含淀粉的食物在经受高温油炸或烧烤时会生成丙烯酰胺(Acrylamide，AA)[1-2]。丙烯酰胺是一种有毒化合物，长期暴露可导致人和动物的神经系统损伤，并具有潜在的遗传和生殖毒性，可诱发哺乳动物机体突变和癌变[3-5]，国际癌症机构(IARC)已将其列为“人类可能的致癌物”(Group 2A)[5]。同时发现除职业接触外，人们还可通过日常饮食(如油炸薯片、薯条、高温烤的面包等)摄入大量的丙烯酰胺[6-7]。目前食品中丙烯酰胺的测定方法主要采用色谱法进行定量检测，尤其是色质联用技术大大提高了测定的灵敏度和准确度，已成为国际关注的检测技术。为了解国内外丙烯酰胺检测技术，包括样品净化、检测方法、存在问题和发展方向，本文对目前国内外关于食品中的丙烯酰胺安全性及检测技术的有关研究进展进行综述。

关键词:丙烯酰胺 食品 检测方法 进展

III

目录 前言........................................................................................................................1 2 丙烯酰胺的简介................................................................................................1 3 丙烯酰胺检测方法的研究进展....................................................................2 3.1 样品前处理过程...............................................................................................2

3.1.1 提取.................................................................................................................2 3.1.2 净化.................................................................................................................3 3.2 丙烯酰胺的检测方法.......................................................................................4

3.2.1 气相色谱、气相色谱-质谱联用分析..................................................................4 3.2.2 高效液相色谱、高效液相色谱-质谱联用分析....................................................5 3.2.3 离子色谱法......................................................................................................5 3.2.4 紫外可见分光光度法........................................................................................6 3.2.5 微分脉冲伏安法..............................................................................................6 3.2.6 酶联免疫法......................................................................................................6 3.2.7 流动注射化学发光法........................................................................................7 4 国外官方丙烯酰胺检测方法简介...............................................................7 5 小结.......................................................................................................................8 6 致谢.......................................................................................................................8 参考文献..................................................................................................................9

IV 1前言

上世纪50年代，聚丙烯酰胺在工业上得到广泛应用，它是目前世界上应用最广、效能最高的水处理絮凝剂，但是其前体物质丙烯酰胺被国际癌症研究中心（International Agency for Research on Cancer，IARC）列为“可能使人类致癌”物质（IIA）。2002年4月，瑞典国家食品局（The Swedish National Food Administration: NFA）和斯德哥尔摩大学（Stockholm University）的科学家联合公布了他们的研究结果：在油炸薯条、土豆片等淀粉类食物中，检测出有致癌可能性的丙烯酰胺（Acrylamide）；其后英国食物标准局及其他国家的研究机构也证实了这一研究成果。2005年世界卫生组织和联合国粮农组织发布报告，警告某些非故意生成的丙烯酰胺污染物可能引起公共卫生问题。中国卫生部也于2005年4月发布公告称：高温加工的淀粉类食品中丙烯酰胺含量较高，应尽量避免连续长时间或高温烹饪淀粉类食品，以减少丙烯酰胺可能导致的健康危害。食品中丙烯酰胺的形成引起了人们的广泛关注。

综上所述，食品是丙烯酰胺的主要暴露源，尤其是我国传统的油炸、烘烤食品油条、烧饼等都含有相当高水平的丙烯酰胺，且消费群体广。因此迫切需要加快对我国食品中丙烯酰胺的检测和形成机理的研究，建立快速、高效、灵敏的检测食品中丙烯酰胺含量的方法尤为重要。本次研究为深入探索食品中丙烯酰胺的形成机制、作用机制及代谢分布，对食品中丙烯酰胺的测定提出更高的要求，寻找更加快速、简便、准确、灵敏度高、范围宽实用性强的分析方法，提高效率降低成本为分析丙烯酰胺的发展方向提供参考。

2丙烯酰胺的简介

丙烯酰胺(Acrylamide，AA)俗称“丙毒”，分子式 CH2CHCONH2（见图1），无色透明片状晶体，无臭，有毒，常温下能升华，比重1.122g/cm3，熔点84.5℃，沸点125℃，易溶于水、乙醇、丙酮，微溶于苯、甲苯[8]。丙烯酰胺分子中含有胺基和双链，化学性质相当活泼，可以发生霍夫曼反应、水解反应、迈克尔型加成反应和聚合反应等。大量动物实验表明，丙烯酰胺具有生殖、神经[9]、遗传[10]等方面的毒性及潜在致癌性[11-13]。基于其累积效应，长期暴露于低浓度的丙烯酰胺尤其是食源性摄入对机体还是具有潜在危害的。

ONH2图1.丙烯酰胺的结构式 3我国丙烯酰胺检测方法的研究进展

自从2002年发现淀粉类食品中含有丙烯酰胺以来，许多方法被用来分析各种不同类型食品中丙烯酰胺的含量。这些方法尽管在样品前处理(提取、净化步骤)不同，但大多采用气相色谱(GC)或液相色谱(LC)分离，质谱(MS)进行定性、定量分析，有良好的准确性和灵敏度。

3.1 样品前处理过程

3.1.1 提取

丙烯酰胺为极性化合物，一般采用水或极性强的有机溶剂提取。常用的提取溶剂有水、甲醇、甲醇-水、丙酮-水、乙醇、乙酸乙酯、正丙醇、二氯甲烷-乙醇等。丙烯酰胺在水中的溶解度最大，且价格低廉，对于大多数食品样品提取完全，是目前应用最为广泛的提取溶剂。丙烯酰胺在酸性溶液中稳定，碱性条件不稳定，所以有人用酸性水溶液作为提取剂，如美国 FDA 建议的方法就用含0.1%的甲酸水溶液提取样品[14]。Yong等[15]用高浓度氯化钠溶液作为提取剂，可有效防止提取过程中的乳化现象并有效提高回收率。也有文献报道用有机溶剂作为提取剂，如日本健康科学研究院和欧美联合实验室就采用丙酮-水混合溶剂提取食品中丙烯酰胺[16-17]。相对于水提法，有机溶剂提取体系具有以下2个优点：同时提取包埋在脂肪微粒中的丙烯酰胺，使提取更完全；便于浓缩作进一步处理。提取过程中还需注意，加热或超声波震荡可产生微小颗粒堵塞固相萃取柱（SPE 柱），降低净化效率，缩短 SPE 柱使用寿命，若采用 SPE 柱净化应避免使用。为保证前处理过程的回收率，通常会在样品均质化后向其中加入内标化合物，常用的内标物有13Ｃ3 标记的丙烯酰胺、13Ｃ1 标记的丙烯酰胺、2Ｈ3 标记的丙烯酰胺等。

以水作为提取剂的方法测定的是水溶性游离丙烯酰胺。pH 是食品中丙烯酰胺形成的重要因素之一[18]，因此 pH 对提取效率的影响值得关注。Eriksson[19] 研究发现，高 pH 提取液相对于中性 pH 条件显著提高了丙烯酰胺的回收率，表明当前测定方法可能低估了某些食品中丙烯酰胺的含量。而Goldmann等[20]通过丙烯酰胺形成的模拟实验研究认为，碱性条件下丙烯酰胺含量的增加，是因为高 pH 使得食品释放更多游离丙烯酰胺，而是强碱性条件下某些尚不明确的分解过程产生了额外的丙烯酰胺。

对于富含脂肪或蛋白质的样品，有时还需要采取去脂或去蛋白的步骤。通常采用正己烷、石油醚或环己烷等非极性的有机溶剂去除样品中的脂肪。富含蛋白质的样品可采用甲醇、乙腈或高浓度盐溶液等极性较强的溶剂进行去除。Delatour 等[21]在前处理过程中，加入1mL 0.68M 三水亚铁氰化钾溶液和1mL 2M 七水硫酸锌溶液，并漩涡振荡1~2min，即可使蛋白质发生沉淀而被去除。在测定中国传统油炸面粉类食品中的丙烯酰胺研究中，王海燕等[22]采用高速（14500 g）、低温（0℃）离心15 min，沉淀、凝固水提取剂中脂溶性物质，简化了提取步骤，提高了提取效率。3.1.2 净化

SPE 柱净化是目前大多数研究者采用的方式，一般需要合并使用多根 SPE柱。一种方式是合并使用 Oasis HLB（填料为高分子聚合物）和 Bond Elut-Accucat（混合型填料:C8、SAX和SCX）固相萃取柱。Becalski等[23] 则合并使用了3种不同的SPE柱:Oasis MAX（混合阴离子交换树脂），Oasis MCX（混合阳离子交换树脂）和 ENVI-Carb（石墨化碳）。国内研究者分别使用传统 C18、自制玻璃层析柱和石墨化炭黑 SPE 柱进行净化处理[24-26]，被测物亦得到很好分离。也有将用硅藻土为填料的 ProElut LLE 串连液液萃取柱进行净化处理[27]，且取样量是 Oasis HLB 柱的5倍，可以得到更高的灵敏度。对于基质复杂食品如咖啡、可可粉等的分析，不同于一般样品的处理，不适用于多根非极性 SPE 柱联合使用进行净化，可以使用以硅胶为基质的键合丙氨基固相萃取柱进行处理，该柱具有极性固定相和弱阴离子交换剂，运用正相萃取原理，适合强极性AA复杂样品分离。

以高分子聚合物为填料的固相萃取柱是丙烯酰胺分析前处理过程中最常用的SPE 柱（以Oasis HLB为典型代表），其吸附剂是由亲脂性二乙烯苯和亲水性N-乙烯基吡咯烷酮两种单体按一定比例聚合成的大孔共聚物。其保留机制为反相，通过一个“特殊的极性捕获基团”来增加对极性物质的保留并提供良好的水浸润性，具有极性强、更好的吸附平衡性、满足所有固相萃取柱通用需求的特点，克服了传统硅胶基质反相填料的对极性化合物保留不足、对碱性化合物回收不足、小柱跑干等缺点，因此被许多研究者广泛应用。Oasis MCX是一种填充混合填料以阳离子交换和反相吸附为原理的固相萃取柱，对碱性化合物具有较高的选择性，也常被用在丙烯酰胺分析的净化过程中。

固相微萃取（SPME）是集采集、萃取、浓缩、进样于一体的样品处理新技术，可与GC、MS、HPLC、MS等联用。近年来在食品中挥发性有机物的检测方面得到了广泛应用。SPME 也可用于提取食品中的丙烯酰胺，但是由于丙烯酰胺的极性较高，难以从液相中分离出来。杨秀培等[28] 用自制的十六醇/聚己二酸乙二醇酯（CA/PGA）固相微萃取探头，对丙烯酰胺有较好的萃取性能，为油炸淀粉类食品中丙烯酰胺的定量测定提供了新的方法。

基质固相分散（MSPD）技术也可用于丙烯酰胺样品的净化处理，样品经水提取后，用硫酸铵饱和沉淀蛋白和盐析，取上清溶液10g 与 5g 硅藻土搅拌均匀后，装入层析柱中。该柱为玻璃层析柱，填少许玻璃棉，压紧，依次填装无水硫酸钠 10g、硅藻土 2g。先用 60mL 正己烷淋洗脱脂，控制流速2 mL/min，弃去淋洗液。再用 70mL 乙酸乙酯洗脱，收集洗脱溶液，并在45℃水浴下氮吹至近干，加入 1mL 超纯水，涡旋振荡。用氮吹吹去上层有机相后，加入 1mL 正己 烷，涡旋振荡，滴管小心吸去上层有机相，下层水相直接进行分析或进一步衍生后分析。相对于 SPE 的方式而言，MSPD 方法使用了大容量的填料，增加了样品的取样量，提高了杂质负载量，同时去除了样品中的蛋白和脂肪，在洗脱时增加了绝对回收，但同时增加了有机溶剂的使用量。

大孔树脂又称全多孔树脂，聚合物吸附剂，它是一类以吸附为特点，对有机物具有浓缩、分离作用的高分子聚合物，广泛用于天然产物的分离纯化、药物制备、有机化合物分离等各领域。国内学者江姗姗等[29]考察了7种不同极性的树脂对酚类抗氧剂参与美拉德反应体系后的产物（绿原酸）静态吸收研究发现，7种树脂（D201、D301、D101、D4020、NKA-

9、AB-

8、D3520）中，D201 能近乎完全吸附实验加入的绿原酸，而对丙烯酰胺的吸附率不足50%。同时将 D201 预处理加入了绿原酸反应后的美拉德体系样品溶液，用 HPLC 法检测，发现丙烯酰胺能完全与杂质分离，具有较高的精密度和准确度，能成功应用于抗氧化剂抑制丙烯酰胺的研究中，也可用于检测酚类物质含量高的食品中的丙烯酰胺。

加速溶剂萃取技术（ASE）是一种在提高温度（50~200℃）和压力（10.3~20.6 MPa）的条件下，利用有机溶剂萃取固体或半固体的样品前处理方法。其优点是溶剂用量少、快速、基体影响小、选择性好、萃取效率高。Cavalli[30]等人以水作为提取溶剂，采用加速溶剂萃取技术得到 MS 的检测限为10~1000 μg/mL。同时瑞士公共安全部门也提出了采用 ASE 提取食品中的丙烯酰胺的方法。

“QuEChERS 净化方法”（quick，easy，cheap，effective，rugged and safe），此方法使用乙腈提取蔬菜中的农药，同时加入硫酸镁（除去水分）和氯化钠（提高提取效率），利用丙基乙二胺（PSA）吸附剂除去提取液中的基质。PSA 中含有伯胺和仲胺基团，具有弱的阳离子交换能力，对食品中脂肪酸、其它有机酸、糖及色素的保留能力好，其净化效果优于中性氧化铝，活性碳等吸附剂。刘燕伟等[31]对 QuEChERS 前处理方法进行了改进，没有引入有机溶剂，采用纯水替代乙腈提取油炸食品中的 AA，消除样品基底的影响；并与 HPLC-UV 联用，对油炸食品中 AA 进行快速测定。基于 QuEChERS 方法对样品前处理无需衍生化，直接使用纯水提取 AA，同时使用 PSA 吸附剂取代传统的固相萃取柱净化提取液，具有快速、简便、可靠、廉价和无污染等特点。

3.2 丙烯酰胺的检测方法

3.2.1 气相色谱（GC）、气相色谱-质谱（GC-MS）联用分析

目前已发表的有关食品中的丙烯酰胺测定的气相色谱方法多采用溴化衍生，测定的终产物包括2, 3-二溴丙酰胺[32-34]和2-溴丙烯酰胺[35-36]，不通过衍生直接分析丙烯酰胺也是可行的，但由于丙烯酰胺可以在进样口人为形成，直接气相色谱-质谱分析法(GC-MS)获得的丙烯酸胺结果可能会高于衍生化GC-MS或LC-MS。另外，必须避免在萃取过程中，尤其是在低水分(如甲醇)、长时间回流条件下丙 烯酞胺的人为形成。目前有几种不经衍生的气相色谱法用于丙烯酰胺测定，包括GC/ MS、GC/ MS/ MS和GC-FID[38]。

气相色谱-质谱联用技术使气相色谱的分离能力和质谱的定性能力有机结合，为气相色谱开辟了新的途径。郭志峰[39]建立了一种测定市售锅巴中的丙烯酰胺含量的方法。该法样品前处理不必经过溴化衍生，样品脱脂后用水提取丙烯酰胺，提取液过活性炭柱，再用乙酸乙酯将活性炭柱中吸附的丙烯酰胺洗脱，洗脱液浓缩后经气相色谱-质谱定量分析，检测限（LOD）为 0.06 mg/kg。3.2.2 高效液相色谱（HPLC）、高效液相色谱-质谱（HPLC-MS、HPLC-MS/MS）联用分析

高效液相色谱法引入了气相色谱理论，在技术上采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分离速度快、效率高和操作自动化。几乎所有的化合物包括高极性离子型待测物和大分子物质均可用 HPLC 进行测定。HPLC 对仪器设备要求不如 GC/MS、LC/MS 且成本较低。德国联邦消费者健康与动物用药保护学会（BgW）公布了液体食物模拟物中丙烯酰胺液相色谱直接测定法[40]，适合于丙烯酰胺含量在 0.01~ 0.10mg/kg 的脂肪类食物如葵花籽油等的检测。国内学者茅力等[41]建立了针对淀粉类食品中丙烯酰胺的高效液相色谱法的检测方法。采用纯水提取食品中丙烯酰胺，经化学净化、固相萃取对样品液进行纯化，高效液相色谱法测定。该法丙烯酰胺在 0.02~10.00μg/ml 浓度范围内线性良好，相关系数 R=0.9993，方法的检测限为 0.005μg/ml，样品加标回收率为87.1% ~ 102.2%，样品测定值日内相对标准偏差 RSD 为1.45%（n=5），日间相对标准偏差 RSD 为1.63%（n=5）。

相对于气相色谱-质谱分析法而言，液相色谱-质谱分析法是更好的选择，可以利用丙烯酰胺易溶于水，在水溶液中可以充分萃取的特点，潜在的缺点是，样品萃取液杂质干扰多以及在常规固定相中丙烯酰胺的保留时间不理想，这一点对于基质复杂的样品尤其显著。要获得理想的灵敏度和准确性，大量繁琐、耗时的样品前处理工作是必要的。美国 FDA 2003-02公布了采用HPLC-MS/MS 以13C3 AA 为内标的同位素稀释技术测定食品中丙烯酰胺的方法[42]。国内张珙等[38]用水溶液振荡提取样品，硅藻土净化，采用 HPLC-MS/ MS和同位素稀释定量技术，以选择反应监测方式测定目标化合物。方法检出限和定量限分别为 4μg/kg，线性范围 10~3000μg/L，不同食品基质的不同加标水平（20~2000μg/kg）回收率90%~105%，RSD<10%，该法定量准确可靠。3.2.3 离子色谱（IC）分析

离子色谱法是由经典的离子交换色谱发展而成的新的液相色谱分析技术，不仅灵敏度高，分析速度快，能进行多种离子的同时分析，而且还能将一些非离子 性物质变成离子性物质后测定，在化工、环境化学、食品化学、生物医药等许多领域都得到广泛的应用。王海波[43]建立了使用离子色谱串联质谱测定食品中丙烯酰胺离子的检测方法。样品经过前处理后，通过离子排斥色谱进行分离，质谱进行定性并进行定量计算。以 IonPac AS1 分析柱进行离子排斥分离。ESI-MS 以选择离子模式对目标离子进行监控，以 SIM 离子72的峰面积进行定量计算。该方法对丙烯酰胺的检出限（S/N=3）为 5μg/L，丙烯酰胺在 2~100μg/L 质量浓度范围内具有良好的线性，线性相关系数 R=0.9996。程喜明[44]通过使用离子色谱测定油炸食品中丙烯酰胺，样品前处理方法与 FDA 提供的方法大致相同。经超声、离心后上清液用离子色谱-紫外检测器检测，通过 IonPac ICEAS1（4mm×250mm）分离柱，IonPac NG1（2mm×250mm）保护柱，紫外检测波长为202nm。结果表明其对3种样品的加标回收率在80%以上，RSD < 5%，最低检出限（LOD）为 0.010mg/kg，相对偏差< 20%。3.2.4 紫外可见分光光度法

紫外可见分光光度法是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。郝亚楠等[45]探讨了用紫外分光光度法测定不同食品样品中丙烯酰胺含量的新方法。试验结果表明：丙烯酰胺的吸光度与其浓度在0.25~6.0μg/L的范围内呈良好的线性关系，回归方程为：Y=0.0958x +0.0294，（R=0.9875），回收率为90.07%~104.8%，RSD 为0.5%。LOD 为0.1μg/L，该方法的优点在于操作简便，提取后可直接测定，不需其他复杂处理，所需时间较短。此外，该法对设备要求小，价格低廉易操作，可用于快速检测。3.2.5 微分脉冲伏安法

脉冲伏安法于1960年由巴克尔（G.C.Barker）等提出的。在普通伏安法中，影响灵敏度的主要因素是充电电流，而此法是在研究消除充电电流的基础上发展起来的一种新的极谱技术。这种技术具有灵敏度高，分辨力强等特点。张文玲等[46]应用微分脉冲伏安法快速测定油炸食品中丙烯酰胺，对分析条件进行了优化，最佳条件为：脉冲幅度 50mV；灵敏度 100μA；电解质为 0.1mol/L的 LiCl 溶液(含2mmol/L H2SO4)，在此条件下丙烯酰胺的氧化还原峰电流较显著；丙烯酰胺的还原峰电流与其浓度在3.0×10-8~9.0×10-8 mol/L范围内呈良好的线性关系，线性方程为 y=440.95x-1.4893(r=0.9954)，检测下限为1.0×10-8 mol/L，回收率为94.4%~103.2%。利用该方法对一些油炸食品中的丙烯酰胺含量进行了测定，测定结果与 HPLC 法测得的结果一致。3.2.6 酶联免疫法 酶联免疫吸附技术（ELISA）是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合的一种免疫分析方法，具有操作简便、快速、有效、特异性强等特点，能批量检测食品中的药物残留、病原微生物以及转基因食品等。付云洁等[47]建立了热加工食品中丙烯酰胺的间接ELISA检测方法，检测范围为50μg/L~1280μg/L，加样回收率为92.6%~95.5%，适用于检测热加工食品中的丙烯酰胺，具有良好的应有价值。3.2.7 流动注射化学发光法

流动注射分析（Flow Injection Analysis 简称FIA）是1975年由丹麦技术大学的 Ruzicka 和 Hanse 提出的新型分析技术。流动注射作为一种强有力的样品处理技术只有特定的检测技术相结合才能形成一个完整的分析体系。化学发光具有仪器简单、灵敏度高等特点，但是由于在通常情况下所使用的发光反应速度很快，所以必须保证样品与发光试剂能够快速有效高度重现地混合。流动注射技术满足了这一要求，它与化学发光分析相结合产生的流动注射化学发光分析（FI-CL）集两者的优点于一身，不仅灵敏度高、线性范围宽，而且快速、重现性好、自动化程度高，目前已在农业药物和环境分析等许多领域得到了迅速的发展。高向阳等[48]建立一种分析油炸食品中痕量丙烯酰胺的灵敏准确、快速简便、成本低廉的新型流动注射化学发光分析方法。样品中的丙烯酰胺经提取后，利用其对鲁米诺-过氧化氢化学发光体系的增强作用进行测定。该法测定丙烯酰胺的线性范围为1.0×10-6~1.0×10-3 mol/L，相关系数R=0.9993，方法检出限为3.95×10-8 mol/L，加标回收率为91%~107%，样品测定的相对标准偏差（RSD）为1.3%(n=9)。国外官方丙烯酰胺检测方法简介

美国FDA方法[14] 取 1g 均质化样品，加入 9mL 水和 1mL 13C3标记的丙烯酰胺内标物(200ng/mL，0.1%蚁酸配制)，漩涡震荡 10min，然后 9000r/min离心 30min；吸取 5mL上清液放到带有 0.45μm滤膜的过滤管上并离心（9000r/min，4min）。采用 6mL Osis HLB和 3mL Bond Elute-Accuat 固相萃取柱进行净化，先用 5mL甲醇和 5mL水活化 Osis HLB柱，取 2mL提取液上样，2mL水洗脱并收集洗脱液，再用 3mL甲醇和 3mL水活化 Bond Elute-Accuat 柱，将洗脱液过柱并收集。样品最后使用LC-MS/MS(ESI+)进行测定，色谱柱为 Aqua C18柱（250 mm×2 mm，5μm），色谱条件为流动相，0.5%甲醇和0.1%乙酸水溶液；流速为0.2mL/min；进样量为 20μL；柱温为26℃。MS检测器温度为240℃，离子源温度为120℃，碰撞气压为1Torr.瑞士公共卫生联邦事务所方法 取均质化样品 5g，加入 50μL 2Ｈ3 标记的丙烯酰胺内标溶液（含量5μg），与 4g硅藻土充分混匀，装入 22mL PLE柱，通过加速溶剂提取（ASE）仪进行净化。在净化过程中，先用正己烷脱脂3次，然 后用乙腈/水（v:v，85:15）提取3次，每次 20min。取提取液 20mL旋转蒸发至1~2mL，加入 15mL水，并用 0.1M 磷酸三纳缓冲溶液进行碱化，超声震荡 1min，将此混合液过 20mL Chemelut 柱，弃去前 15min流出液，然后用 100mL乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，旋转蒸发定容至 0.5mL，进样前 0.45μm过滤。样品用LC-MS/MS(ESI+)进行测定，色谱柱为石墨炭黑柱(125 mm×2.1 mm，5μm)，色谱条件:梯度洗脱，0.01 M蚁酸水溶液在 10min内由100%变为25%，再恢复至100%维持 5min；流速为0.2mL/min；进样量为10μL；柱温为20℃。MS检测器离子源温度为350℃。

路易斯-巴斯德公共卫生科学研究院方法 该方法与美国 FDA 测定方法相似，但用2Ｈ3 标记的丙烯酰胺作为内标，色谱柱为 u-Bondapak RP18柱(300 mm ×3.9 mm，10μm)，色谱条件为流动相，0.1%乙酸水溶液；流速为 0.2mL/min；进样量为 100μL；柱温为室温。小结

不同的前处理技术有其各自的适用范围和优缺点，在实际工作中，应根据待测样品的种类和基质、测定结果要求和检测仪器的不同，并结合实际条件选用合适的样品前处理方法。固相微萃取、加速溶剂萃取、基质固相分散等新技术具有广泛的应用空间。目前食品中丙烯酰胺的卫生标准尚未建立，各国正广泛开展食品中丙烯酰胺的研究，尝试了多种方法测定食品中丙烯酰胺，见诸报道的有气相色谱法（GC），液相色谱法（LC），气相色谱-质谱联用法（GC-MS），液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）等，但是这些方法在分析时间、成本及普及性方面各有长短，其最大的问题在于仪器昂贵，样品前处理方法复杂繁琐，成本高，不利于在我国普及。食源性接触丙烯酰胺对人类健康的影响与分析方法和分析数据的可靠性有直接的关系，食品中痕量丙烯酰胺的检验重点是做好样品前处理和检测方法的选择。鼓励新型的检测方法，诸如靶细胞分析定量，DNA损伤测定等生物传感技术应用于丙烯酰胺的定量和定性分析检测中。致谢

感谢指导老师曹振彩老师在论文完成过程中给予的鼓励、指导和帮助，曹老师认真严谨的治学理念和求真务实的科学思想是我学习的榜样，在此表示诚挚的感谢！另外，学习中心杨建军老师和薛宏伟老师在我学习期间给予了真挚热情的关心和帮助；论文在设计写作过程中还得到了药用植物研究所资源中心全体师生的帮助和支持，生活中我的家人和好友也给予了不懈的支持，在此，对以上支持帮助我顺利完成论文的同事及亲友表示感谢。参考文献

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