第一篇：实验动物学重点汇总

一、实验动物、近交系动物、转基因动物、屏障环境

实验动物(Laboratory Animal): 是指经人工饲养、繁育，对其携带的微生物及寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的，应用于科学研究、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。包括四个基本内涵：

1.遗传背景明确（近交系、封闭群、杂交群）

2.对携带微生物和寄生虫实施控制（普通动物、清洁动物、无特定病原体动物、无菌动物）3.在特定的环境条件下，人工培育而成的动物 4.应用范围明确

近交系(Inbred Strain)是指至少连续经过20代以上全同胞兄妹或亲子交配，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。近交系动物的近交系数（Inbreeding Coefficient）应大于99%。近交系动物的特点：

1．基因纯合性和同基因性 2．各品系均具有独特的特性

3．研究结果的一致性

4．可作为有价值的动物模型

5．具有标准实验材料特性

6.遗传背景清楚

通过实验手段将新的遗传物质(外源性的基因片段)导入到动物的胚细胞中，并能稳定的遗传，由此获得的动物称为转基因动物。常用的方法有显微注射法、逆转录病毒载体法、胚胎干细胞介导法、精子载体法、电转移法、基因直接导入法等。

屏障环境：与外界隔离，是饲养清洁级动物和SPF级动物的设施。进入实验动物生存环境的空气须经过滤净化处理，其洁净度相对于10000级，进入屏障内的人、动物和物品如饲料、水、垫料及实验用品等均需有严格的微生物控制。

二、实验动物环境设施分类

实验动物设施是指实验动物和动物实验设施的总和。一个设施可以大到动物中心或生产繁殖机构，小至某一实验动物室。总体的原则是提供实验动物最适宜的环境，保障实验动物的质量和为动物实验的准确性提供可靠保障。

（一）、按其功能分类

1．动物生产设施（Animal Production Facility）指用于实验动物的饲育繁殖、生产的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。

2．动物实验设施（Animal Experimental Facility）指用于研究、试验、教学、生物制品、药品生产、检定等为目的进行实验动物饲育、试验的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。

3．特殊动物实验设施（Special Animal Experimental Facility）指用于感染、毒理动物实验、病原微生物和细胞培养、重组DNA、转基因动物实验、克隆和胚胎干细胞、细胞实验和应用特殊化学物质等进行实验的建筑物、设备以及包括运营管理在内的总和。

（二）按微生物控制程度分类

1．普通环境（Open System）

直接与外界大气相通，是饲养普通级实验动物的场所。饲料、饮水要符合卫生要求，垫料要消毒，饲养室内要有防鼠、防昆虫等措施。

2．屏障环境（Barrier System）

与外界隔离，是饲养清洁级动物和SPF级动物的设施。进入实验动物生存环境的空气须经过滤净化处理，其洁净度相对于10000级，进入屏障内的人、动物和物品如饲料、水、垫料及实验用品等均需有严格的微生物控制。3．隔离环境(Isolation System)

与外界环境完全隔离的环境内。工作人员通过隔离器上组装的无菌手套进行操作，不直接接触动物。饲料、饮水，垫料，笼具等都应高压、高温灭菌。进入隔离器内的一切物品均需通过传递舱灭菌。适合饲养SPF、无菌动物、动物的保种育种或同等级的动物实验。

（三）按设施的平面布局分类

1．无走廊式(No Corridors)

用于饲养品种单一或以实验为主的设施。一般饲养普通级动物

2．单走廊式（Single Corridors）

一般的研究机构在进行中、短期动物实验。相对于双走廊其优点是占用空间小，设施利用率较高，维护费用低。缺点为清洁笼具和污染材料之间常常存在污染的危险，走廊相对拥挤。

3．双走廊式（Double Corridors）

常用的一种实验动物屏障设施类型。可以有效分割为清洁区和污染区。作为屏障设施使用，比较容易控制微生物污染。缺点是有效利用面积减少。

4．三走廊式（Three Corridors）

三走廊式压力梯度从中间的洁净走廊、前室、动物饲养室、污物走廊逐渐降低，是目前常用的动物实验设施。

三、地鼠的习性、特点（颊囊、冬眠）地鼠的习性： 1．生活习性

中国地鼠，灰色，个体小，体长约10cm，背部中心有黑色条纹。白天基本上睡眠，行动笨拙。昼伏夜行动物，一般在夜晚8～11点最为活跃，运动时腹部着地，行动不敏捷，巧手营巢，牙齿十分坚硬，可咬断细铁丝，兴奋时发出强烈的金属性音响。地鼠好斗，雌性比雄性大而且凶猛，受惊时会咬人。除发情期外，雌鼠不易与雄鼠同居，且雄鼠易被雌鼠咬伤。

2．采食性

有很强的贮食习性，可将食物存贮于颊囊内。其颊囊可充分扩张，贮藏能力极大，便于冬眠时食用。地鼠口腔内两侧各有一个很深的颊囊，一般深度为3.5～4.5厘米，直径为2～3厘米，一直延续到耳后颈部。通过颊囊将大量食物搬于巢中。

3．嗜睡性

睡眠很深时，全身肌肉松弛，且不易弄醒，有时误认为死亡。室温低时出现冬眠，一般于8～9℃时可出现冬眠，此时体温、心跳、呼吸频率、基础代谢率均降低。室温低于13℃则幼仔易于冻死，室温最好保持20～25℃，相对湿度40～70%。

地鼠的特点：

（一）解剖学特点：

1．头骨较长，门齿孔小，臼齿呈三棱形，齿式为2（门1/1，犬0/0，前臼0/0，臼齿3/3）=16，门齿能终生生长。

2．口腔内两侧各有一个颊囊。颊囊缺少腺体和完整的淋巴通路，因此对外来组织不产生免疫排斥反应，可用于异体移植。中国地鼠颊囊容易翻脱。

3．在臀髋部有一种腺体，当地鼠处于性兴奋状态时，分泌物会使局部皮肤湿润。雌性地鼠不如雄性发育完全，腺体外露也不明显。

（二）生理学特点：（略看）1．地鼠生殖周期短。

金黄地鼠性周期开始出现年龄为30～32日龄，妊娠为16（14～17）d，为啮齿类动物中妊娠期最短者。哺乳期20～25d，离乳后雄鼠2月龄，雌鼠 1.5月龄可配种。成熟期时除发情期以外雌鼠不许雄鼠靠近。年产5～7胎，每胎产仔约7只。平均寿命2～3年。

2．出生仔鼠体重2～3.3g，离乳时体重可达25～28g，成年体重约为150g，雌鼠体重比雄鼠稍大。成年中国地鼠体重约为35g，雄鼠则比雌鼠大。

3．地鼠对皮肤移植的反应特别，封闭群内个体间皮肤移植常可存活，并能长期生存下来，但不同群体间移植则100%被排斥。这一现象正吸引着许多免疫工作者进行深入的研究。4．中国地鼠（黑线仓鼠）与金黄地鼠解剖生理特点基本相似，但也存在一些差异，如中国地鼠的染色体少而大，二倍体细胞 2n=22，大多数能相互签别，定位明确，尤其Y染色体在形态上是独特的，极易识别。无胆囊，大肠长度比金地鼠短1倍，但脑重、睾丸大均比金地鼠重近1倍。

三、实验动物人性化及3R 至少要满足动物五种基础需要:1.足够饮水和营养良好的食物；2.任何时间不受饮水的限制3.免受痛苦和疾病的折磨；4.免受焦虑和害怕的折磨；5.能够表达正常生理学行为，如躲藏、犊和互相关照等。3R的基本内涵：

减少 Reduction）是指在科学研究中，使用较少量的动物获取同样多的实验数据或使用一定数量的动物能获得更多实验数据的科学方法。

替代(Replacement)是指使用其它方法而不用动物所进行的试验，或者说是使用没有知觉的试验材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎动物进行试验的一种科学方法。

优化（Refinement）是指在符合科学原则的基础上，通过改进条件，善待动物，提高动物福利或完善实验程序和改进实验技术，避免或减轻给动物造成的与实验目的无关的疼痛和紧张不安的科学方法。

3R研究的意义：

（一）3R作为提升突破技术壁垒能力的载体和具体体现“标尺”，在经济发展和国际贸易中发挥不可替代的重要作用

（二）为科学发展提供了新思路和新方法

（三）开展“3R”研究，从保护动物，或是关注动物福利的角度出发，这也是时代发展、社会进步在科技上的一种体现。

五、小鼠的行为和生理学特点

（一）行为学特点

1.性情温顺，胆小怕惊，对环境反应敏感。

2.喜居于光线暗的安静环境，昼伏夜动，喜欢啃咬。3.社会群居性。

（二）生理学特点

1．小鼠体型小

2．体温与能量代谢。对小鼠需要供给充足的饮水。小鼠饮水量为4～7ml/d。

3．泌尿 小鼠尿量较小，一次排尿仅1～2滴。与其他哺乳动物不同的是，小鼠尿液中含有蛋白质和肌酸酐。

4．生殖 生长期短、成熟早、繁殖力强。小鼠6～7周龄时性成熟，性周期为4～5d，妊娠期为19～21d；哺乳期为20～22d；有产后发情特点，每胎产仔数为8～15头，一年产仔胎数6～10胎，繁殖率很高，生育期为1年。小鼠为全年多发情动物，发情周期可分为前期、发情期、后期和间情期四个阶段，每个阶段阴道粘膜均发生典型变化，通过阴道涂片可判断处于哪个阶段。交配后10～12h，雌鼠在阴道口形成一个白色的阴道栓，这是受孕的标志。

六、近交系繁殖生产

近交系动物繁殖方法的选择原则：保持近交系动物的同基因性及其基因的纯合性。

（一）引种：繁殖用原种的近交系动物必须遗传背景明确、来源清楚、有较完整的资料（包括品系名称、近交代数、遗传基因特点及主要生物学特征等）。引种动物必须来自近交系的基础群。

（二）繁殖：近交系动物的繁殖可分为：基础群（Foundation Stock）血缘扩大群（Pedigree Expansion Stock）生产群(Production Stock),当近交系动物生产供应数量不是很大时，一般不设血缘扩大群，仅设基础群和生产群。

1.基础群：严格以全同胞兄妹交配方式进行繁殖；对动物个体记录要详细，包括品系名称、近交代数、动物编号、出生日期、双亲编号、离乳日期、交配日期、生育记录和繁殖系谱等。基础群（包括血缘扩大群）的动物不超过5～7代都应能追溯到一对共同祖先。基础群应定期对遗传特性和均一性、病原微生物和寄生虫、环境等检查和监测。基础群动物保种方式：1.平行线式2.单线式3.综合式。也可用于近交系动物的培育（1）平行线式：基础群中的每对全同胞作为一个家系，每个家系繁殖一代后选留一对动物进行全同胞交配，以此类推，以保持基础群。（2）单线式：基础群每对同胞交配繁殖一代后，选留其中一个家系，淘汰其他家系，选中的家系再留数对进行同胞交配繁殖，下一世代仍保留其中一对的后代，淘汰其他后代，如此一代一代繁殖保种。（3）综合式：基础群中每个家系作全同胞交配，每个世代每个家系留一对继续繁殖，若其中某一家系不能继续繁殖下去，则由繁殖力高的一个家系补足，以维持数个家系同步延续，以保证种群和延续。

2.血缘扩大群：种用动物应该来自基础群,，以全同胞兄妹交配方式进行繁殖，设个体繁殖记录卡，血缘扩大群动物不超过5～7代都应能追溯到其在基础群的一对共同祖先。

3.生产群：种动物来自基础群或血缘扩大群。生产群动物一般以随机交配方式进行繁殖。应设繁殖记录卡，生产群动物随机交配繁殖代数一般不应超过4代。

七、封闭群引种

以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖 4 代以上，称为封闭群，亦称远交群（Outbred Stock）。

引种：繁殖用原种的封闭群动物必须遗传背景明确，来源清楚，有较完整的资料（包括种群名称、来源、遗传基因特点及主要生物学特性等）。一般小型啮齿类封闭群动物引种数目不能少于25对。

哈迪-温伯格Hardy-Weinberg定律，也称基因平衡定律。等位基因频率:群体中，一条染色体上某种等位基因数与该染色体上全部等位基因数之比。基因型频率:群体中，某基因型个体数与该群体全部个体数之比。

八、大鼠解剖学特点、肝脏再生、无胆囊、环尾病、裸大鼠的免疫学特点

解剖学特点：

1.门齿终生不断生长，需磨损维持其定。

2.食道与十二指肠相距很近，胃中有一条皱折，收缩时会堵住喷门口，这是大鼠不会呕吐的原因。3.肝脏再生能力强，无胆囊，来自各叶的胆管形成总胆管，开口于十二指肠的乳突上。4.肺结构特别，左肺为1个大叶，右肺分成4叶。5.心脏和外周循环与其他哺乳动物不同。心脏的血液供给既来自冠状动脉，也来自冠状外动脉。6.右肾比左肾靠近头侧，肾为蚕豆形，右侧比左侧稍高。单乳头肾，肾脏前端有一米粒大的肾上腺。7.雌性生殖器呈圆形，有凹沟，子宫为丫型双角子宫，左右子宫角的腔是完全分开的。两个子宫颈独立地开口于阴道。胸部和腹部各有3对乳头。

大鼠无胆囊，肝脏再生能力强，不能呕吐，因此不能用于做催吐实验。

当环境湿度低于40％时，大鼠易患环尾病（环状坏死症）。

裸大鼠的免疫缺陷特征：①免疫器官的组织学与裸小鼠相似，幼龄裸大鼠的解剖发现，有胸腺残迹，内有未分化的上皮细胞，但未见淋巴细胞；②先天性无胸腺，无T细胞，T细胞功能缺失，但B细胞功能正常，NK细胞的活力较正常鼠高。

附：裸大鼠的一般特征：

①体毛稀少，裸大鼠并不像裸小鼠一样完全无毛，而是体毛稀少，尾根往往多毛； ②发育迟缓与裸小鼠一样发育相对较缓慢，体重为正常大鼠的70％左右；

③繁育能力差，由于裸大鼠与裸小鼠一样在妊娠期间乳腺发育缺损，故其繁殖方式同裸小鼠相同，即用纯合子的雄鼠与杂合子的雌鼠交配方式进行繁育；

④易患呼吸道疾病，由于其无胸腺，免疫力低下，因此易感各种疾病，特别是在环境较差时，易感溃疡性气管炎和化脓性支气管炎等，生存时间约6～7个月。

九、豚鼠的补体、常用犬品种

豚鼠特别是老龄雌鼠的血清中含有丰富的补体，是所有实验动物中补体含量最多的一种动物，易引起变态反应。其补体非常稳定，免疫学实验中所用的补体多来源于豚鼠血清。豚鼠是速发型过敏性呼吸道疾病的动物模型，是过敏性休克和变态反应的首选实验动物。常用实验动物接受致敏物质的反应程度不同，其顺序为：豚鼠＞家兔＞犬＞小鼠＞猫＞蛙。（注：变态反应也叫超敏反应，指机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。）

国际上用于医学科学研究的常用犬主要有小猎兔犬、墨西哥无毛犬、四系杂交犬、Boxer黑白斑点短毛犬等。

十、兔解剖特点

1．口腔小，上唇分开 齿式为2（门2/1，犬0/0，前臼3/2，臼齿3/3）=28。唾液腺有4对，即腮腺、颌下腺、舌下腺和眶下腺。

2．家兔为单胃。盲肠非常大，占腹腔的1/3。在回盲处有特有的圆小囊。

3．雄兔睾丸可以自由地下降到阴囊或缩回腹腔。雌兔为双子宫，有乳头3～6对。兔为单乳头肾。

4．兔的胸腔构造:纵隔将胸腔分左右两室，互不相通。颈神经血管束中减压神经易于分离。

5．幼兔的消化道发生炎症时，消化道壁即成为可渗透的，这样消化道中的有害物质易被吸收，这就是幼兔腹泻时容易自身中毒而死亡的原因。

十一、动物饲养室有害气体

主要有害气体：氨、甲基硫醇、硫化氢、硫化甲基、甲基丁烷、三甲胺、苯乙烯、乙醛和硫化二甲基。

附：信息素（pheromone）或叫引物信息素（primer pheromone）

①Lee-Boot效应，是指小鼠群养时常常发生假性妊娠和发情周期混乱的现象。

②Whitten效应，是指由于雄性动物分泌的信息素促使雌性动物的发情周期出现有规律的现象。③Bruce效应，是指怀孕初期的雌性小鼠与交配对象以外的雄性接近或同居时产生的中止妊娠反应。

十二、动物实验前准备：

准备工作的内容有： 1.饲养室和饲养器具的准备 2.动物数目的确定 3.动物的购入 4.动物的称重

5.动物的分组标记及动物的管理等。

动物的购入时注意事项 ：

1．各项实验前的准备工作是否已落实，如动物笼具数量、清洁卫生情况、动物观察室内是否已消毒。

2．购入动物时应向供应部门索取动物的遗传背景资料、实验动物有效的质量合格证、实验动物微生物控制的检查资料以及动物的年龄和健康等方面的资料。

3．如若是清洁级以上级别的动物，其运输工具应严格检查密封状况。购入动物回到实验室的时间不宜太长。如若是长途运输，还应考虑到途中各种因素对动物的影响，如运输环境的温度、湿度、饮食等等。尤其要注意动物在途中不能被污染和引起窒息死亡。

4．动物健康检查：应对购入动物的健康情况进行详细检查，检查包括：（1）外观。一般常发生异常的部位及其外观检查内容有：

皮毛：有无光泽和脱毛变化。

口腔：流涎、出血、粘膜汤疡、口臭等。

鼻腔：鼻汁、出血、干燥（有些动物鼻镜干燥）。

眼：眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等。

耳：外伤、耳壳曲折、贫血、中耳炎等。

尾：弯曲、断折等。

四肢：弯曲、脱臼、外伤、关节炎等。

肛门：下痢、血便、脱肛等。

（2）营养状况。被毛逆立、精神倦怠、瘦弱或过肥等属于营养不良。（3）饲料、水摄入量。有无采食减少、食欲低下、过食等。

（4）动物状态。不活动、转圈运动、卧地不起、跛行、痉挛等属不正常。

十三、动物分组标记

1．染色法

染色法是用化学试剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染，或用不同颜色等来区别各组动物，是实验室最常用、最容易掌握的方法。常用的标记液有：①3％～5％苦味酸溶液（黄色）。②0.5％中性红或品红浴液（红色）。③2％硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照10分钟）。④煤焦油酒精溶液（黑色）。

标记时用标记笔蘸取上述溶液，在动物体表不同部位涂上斑点，以示不同号码。编号的原则是：先左后右，从前到后。2．烙印法 3．挂牌法

4．耳孔法

一般来说，小型动物适宜用耳孔法和染色法，中型动物适用挂牌法和烙印法。

十四、影响动物和实验的因素

• 气候因素（温度、湿度、气流速度等）• 理化因素（照明、声音、气味等）• 居住因素（房屋、笼具、垫料等）

• 同种动物间因素（饲养密度、社会地位、势力范围等）

附：

1、实验动物科学的定义：是研究实验动物和动物实验的一门新兴学科。

2、实验动物:略。动物实验:以实验动物为材料，采用各种手段和方法在实验动物身上进行实验，研究实验过程中实验动物的反应、表现及其发生机制、发展规律，以探讨生命科学的疑难问题。

3、种（Species）：是生物学分类系统中最基本单位。同种间可相互交配且后代有繁殖能力的同一类的动物。

品种（Stock，Breed）：是研究者根据不同需要而对同一“种”的动物进行改良和选择（即定向培育），并具有某种特定外形和生物学特征，并能较稳定地遗传的动物群体。

品系（Strain）：指动物群体来源明确，在其内部采用某种交配方法繁殖，个体间具有相似的外貌、群体内都有独特的生物学特征和基本稳定的遗传特性，可用于不同实验目的的动物群体。

亚系（Substrain）：是由同一个近交系分离出来的具有各不相同特性的品系。残余杂合性和突变而导致部分遗传组成的改变。

支系(Subline)：是指品系或亚系经过人工技术处理后称为支系。

4、普通动物（conventional animal，CV；一级动物）：指不携带主要人兽共患病病原和动物烈性传染病病原的动物。仅可用于示教、科研的探索方法、预试之用。清洁动物（clean animal，CL；二级动物）：指除普通级动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原的动物。

无特定病原体动物（specific pathogen free animal，SPF；三级动物）：指除普通、清洁级动物应排除的病原外，还不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的动物。

无菌动物（germ free animal，GF；四级动物）：指无可检出一切生命体的动物。

悉生动物（gnotobiotic animal，GN；四级动物）：又称已知菌（丛）动物，饲养于隔离系统。具有更强的生活力和抵抗力，更易于饲养管理。

第二篇：中医大实验动物学重点要点

实验动物:是经人工饲育、对其携带的微生物实行控制、遗传背景明确或者来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。

实验动物的三大特点:遗传背景明确,来源清楚;对其携带的微生物、寄生虫进行人工控制;用于科学实验

实验用动物:一切用于科学实验的动物。(野生动物；经济动物；观赏动物;实验动物)实验动物与实验用动物的区别：实验用动物是指所有用于动物实验的动物，包括实验动物。而实验动物是为研究的需要而培育的。确定是否是实验动物，要经过一系列检测，如微生物和遗传基因等，经专家鉴定才能称其为实验动物.动物实验是为科研、教学、药品检定等目的，对动物进行物理、化学和生物因素处理，观察其反应，获得实验数据，解决科研中的问题。即如何使动物实验合理化、规范化。简而言之，实验动物科学就是关于实验动物标准化和动物实验规范化的科学。3R 原则：减少；替代；优化

研究热点:基因治疗;异种器官移植;基因工程动物研究;3R研究 实验动物是现代医学生物学研究的重要支撑条件

AEIR要素：在生命科学领域里进行实验研究有四个支撑条件，即AEIR要素。即A：实验动物；E：仪器设备；I：情报信息；R：化学试剂

自然分类的方法：即根据动物的形态结构、生理机能、生态和地理分布等方面作为分类的标准。

种是分类的基本单位，它不是单独的个体，而是一群特性相似的个体总称。

实验动物现在一般按下列两种方法进行分类：按遗传学控制分类;按微生物学控制分类 品种：是人们根据不同需要而对动物进行改良、选择，即定向培育，并具有某种特定外形和生物学特性的动物群体，其特性能较稳定地遗传。

品系： 指来源明确，并采用某种交配方法繁殖，而具有相似的外貌、独特的生物学特征和稳定的遗传特性，可用于不同实验目的的动物群体。

按遗传学控制分类，实际上是根据基因的纯合程度来分，实验动物可分为:近交系;封闭群;杂交群

近交：血统和亲缘关系相近两个体间的交配，针对某一性状来说指基因型相同或相近的两个体之间的交配。

近交效应：使基因纯合；产生近交衰退

在实验动物的育种中，多采用全同胞兄妹交配的形式。

近交系：经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。亚系：残余杂合性；突变；遗传污染

3、近交系的特征：①基因纯合性 ②同基因性③表现型的均一性 ④遗传稳定性⑤可辨识性⑥个体性⑦国际分布⑧背景资料的可查性

近交系小鼠（除地鼠以外）国际命名法是近交系动物命名的基本参照法。

封闭群动物：以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上。

杂交群：两个近交品系动物之间进行有计划交配所获得的第一代动物。系统杂交动物（F1动物）杂种F1代动物不是一个品系或品种

命名：其杂交动物的雌性亲代名称在前，雄性亲代名称居后，二者间以大写英文字母“X”相连表示杂交。

鼠痘病毒：鼠痘是由鼠痘病毒引起的传染病。急性引起大批动物死亡。亚急性或慢性使患鼠肢尾肿胀，发炎和坏疽脱落，呈“缺肢”畸形。实验动物常见细菌感染对实验的干扰：引起人兽共患病的细菌;动物致病菌;条件致病菌 按对微生物控制的净化程度,国际上把实验动物分为：无菌动物；悉生动物；无特殊病原体动物（SPF动物）；普通动物

实验动物在我国分四级：无菌动物;无特定病原体动物(SPF动物);清洁动物;普通动物 无菌动物：以无菌技术获得，用现有的科学知识和检测技术，不能从动物体表及体内检出任何活的微生物和寄生虫的动物。

无”: 不是绝对的，而是相对的，是以现有的科学知识和检测技术不能检测出活的微生物和寄生虫。“菌”：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体、真菌、寄生虫 “非一过性无菌”：不是用抗生素来得到的一过性的无菌，而是以无菌技术获得的。

在1895年Nuttall等人经剖腹产，用牛奶饲喂获得了无菌豚鼠，无菌动物的培育和使用是实验动物科学的第二次重大进展。

广义的悉生动物包括无菌动物，悉生动物、SPF动物。狭义的仅指悉生动物。

悉生动物：通常是指在无菌动物的基础上，经人工植入已知菌的动物，又称为已知菌动物或已知菌从动物。

无特定病原体动物：指不携带人兽共患病原体，而且不携带主要潜在感染或条件致病和对科研实验干扰大的病原体的动物。或指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。悉生动物与ＳＰＦ动物的异同：

相同点：体内都无病原微生物，但都带有非致病的其它微生物种类。

不同点：悉生：带哪些微生物是清楚明了的。SPF：只清楚体内排除了哪些微生物，真正体内带有微生物的情况是不清楚的。

普通动物：是微生物控制标准最低的动物。对实验结果的反应性较差

按微生物学控制标准,即根据微生物的净化程度及携带的寄生虫状况,将实验动物分为四级: 一级,普通级动物；二级,清洁级动物；三级,无特定病原体动物（SPF）；四级,无菌动物。卫生部级课题及研究生毕业论文等科学实验必须应用清洁级以上的实验动物”。

环境控制： 是研究饲养条件对实验动物的健康和质量所产生的影响，以及研究改善饲养条件的措施。

饲养条件：饲养过程、饲养管理、饲养环境

环境因素的分类：

1、气候因素：温度、湿度、气流、风速等

2、物理因素：照明、噪音、粉尘等。

3、化学因素：空气（O2和CO2）、臭气（NH3、H2S）和各种有害气体（SO2、NO2）

4、居住因素：房舍、饲养笼具、垫料、喂食器和饮水器，内环境等。

5、生物因素：微生物、动物密度、人、动物之间

实验动物设施的基地选择要求如下： 应避开自然疫源地； 宜环境安静；宜环境空气质量较好;应远离易燃、易爆物品的生产和储存区，并远离高压线路及其设施； 距离公共场所和居住建筑应间距应不少于 20m。

根据实验动物的微生物控制程度和空气净化程度分为：隔离系统；屏障系统；开放系统

1、动物饲育室的建筑：

（1）墙壁：要求光洁平滑、无裂口、耐腐蚀、耐洗涤剂的洗刷，不宜将水管、风管或其他线路裸露在墙上，不易清理。

（2）地板：地面宜采用水磨石，平整而不滑，耐水，耐磨，耐腐蚀，防潮。地面最好不设门槛。

（3）天花板：耐水耐腐蚀，其结构应力求简洁平滑。如同墙面，不应在天花板下出现明管。（4）窗：除了采用自然通风的开放系统外，最好不设可开启的窗户，可采用双层玻璃作窗户

（5）门： 饲养室的开门方向与室内通风情况相适应，室内为正压的门要往里开，室内为负压的门要向外开，门边上要有密封条，门上方应有玻璃做窥视窗，下方设有金属板。门要有防野鼠进入装置，门的规格大小应考虑室内最大物品的进出方便，最小不能低于0.9米宽、2米高，普通动物房应设有纱门。

（6）走廊：在清洁级以上的动物室最好设双走廊，即清洁走廊和污染走廊。

1、动物设施中建筑物的布局应根据以下几个原则而定：a、有利于防治疾病的传播和相互的感染b、便于工作、实验人员的操作c、清洁物品、污染物品运送的路线应分开，人员、物品、动物空气要单向移动。

1.营养：指的是一个过程，是指动物摄取、消化、吸收和利用食物中的营养物质以维持生命、生产产品的整个过程。

2.营养控制：通过研究营养素对动物生命活动的影响，揭示养分与生命间定性、定量规律。3.营养素： 即营养成分，凡能被动物用以维持生命活动、生产产品的物质。

4.饲料：指在正常情况下，凡能被动物采食，无毒、无害且能提供营养物质或有利于营养物质代谢的所有物质。营养素的功能：

结构物质：脂肪、蛋白质、碳水化合物、粗纤维。能源：脂肪、蛋白质

代谢调节物：矿物质、脂肪酸 附属功能：形成产品（蛋、奶）

蛋白质：是由氨基酸（机体所需的氨基酸有20种）组成的一类数量庞大的物质的总称。蛋白质是动物生命活动最基本的营养物质。

蛋白质生理作用 ：1.是构成机体器官、组织、细胞的基本材料2.是组织更新、修补的主要原料3.是机体生理功能的物质基础4.可供能和转化为糖和脂肪

必需氨基酸：动物体内不能合成或合成的量和速度不能满足动物的需要，必须从外界食物（饲料）中摄取的氨基酸。有10种：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸。

非必需氨基酸：指人体可以自身合成或由其它氨基酸转化而得到，不一定非从食物直接摄取不可。包括：谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝氨酸和酪氨酸等

脂肪生理作用 ：1.是组成机体组织的重要成分2.是体内能量的重要来源，也是储能的最好形式3.是脂溶性维生素的溶剂4.具有保温、保护脏器的作用

碳水化合物生理作用 ：1.无氮浸出物（1）供能与储能（2）机体某些细胞的重要成分（3）形成产品：奶、蛋 2.粗纤维（1）填充胃肠道，使动物有饱食感。（2）促进胃肠发育、蠕动和粪便排泄。（3）供给能量（指草食动物－盲肠）

矿物质生理作用 ：1.构成动物组织的重要成分：2.维持正常的渗透压、酸碱平衡、神经肌肉的兴奋性3.构成酶的辅基、激素、维生素、蛋白质和核酸的成分和参与酶的激活 维生素生理作用 ：1.是人体不可缺少的物质 2.营养作用

水的生理作用 ：1.是动物体内最重要的营养物质2.具有保持体温恒定的作用3.具有润滑作用4.有助于保持细胞和动物体格的形状

小鼠：耳耸立呈半圆形，有平衡、散热等功能 ；食道内壁有一层厚的角质化鳞状上皮。不耐饥饿。肠道短小。盲肠不发达；有胆囊；胰腺分散在十二指肠、胃底及脾门处。下颌骨形态不同品系有差异，可以进行遗传学检测。脾脏有明显的造血功能。大动物（如狗、猴）则无造血功能，只有贮血功能。骨髓为红骨髓,无黄骨髓，终生造血。腭或咽部无扁桃体。雌：无宫外孕，乳腺癌可发生在颈、背部。雄：睾丸大，共2个。不适宜做慢支炎模型及去痰平喘药的疗效实验。

生理功能及行为习性：1.体型小、易于饲养管理和实验操作 2．性成熟早、繁殖力强（18个月以上属于老年小鼠）3．昼伏夜动、喜黑暗（采食、交配均在夜晚进行，镇静试验、壮阳试验在晚上进行。）4．喜群居、雄鼠好斗，体臭传情（“理发师”。雄鼠具有分泌醋酸氨臭气的特性）5.性情温顺、胆小怕惊6．适应性差7.多种毛色，便于遗传学研究8.对外界刺激极为敏感，对多种病原体和毒素具有易感性，对致癌物敏感，自发肿瘤多。

BALB／c小鼠主要特性：①乳腺肿瘤自然发生率低，但对乳腺肿瘤病毒敏感；②易患慢性肺炎。③对放射线甚为敏感。⑤有自发高血压症，老年鼠心脏有病变，雌雄性小鼠均有动脉硬化。⑥对鼠伤寒沙门菌补体敏感，对麻疹病毒中度敏感。

C57BL 主要特性：①乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。②对放射物质耐受力强。③对结核杆菌敏感。氨基甲乙酯处理后尾静脉注射引起肺部结核 C3H主要特性： ①乳腺癌发病率高，6～10月龄雌性小鼠乳腺癌自然发生率达85％～100％，乳腺癌通过乳汁而不是胎盘途径传播。14月龄雌性小鼠肝癌发生率为85％。③仔鼠下痢症感染率高。④对狂犬病病毒敏感。⑤雄性小鼠对氨气、氯仿、松节油等甚为敏感，病死率高。

DBA/2：①雌性小鼠乳腺肿瘤发生率，繁殖鼠(经产母鼠)为66％，处女鼠为3％。②听源性癫痫发作，35日龄小鼠为100％，55日龄后为5％。③雄性小鼠接触氯仿和乙二醇的氧化物，以及维生素K缺乏时，病死率高。

大鼠：在口腔充满食物时，仍可进行呼吸。大鼠不会呕吐，不能做催吐实验（狗、猫、猴等动物呕吐反应敏感，则宜选用）。适于肝外科实验研究。无胆囊（鸽、鹿、马、驴、象等动物没有胆囊）不能做胆功能观察。不具备胆囊浓缩胆汁和储存胆汁的功能，适宜作胆管插管模型，不耐饥饿。胰腺与脂肪组织的区别 是：胰腺颜色较暗，质地较坚硬。适宜作支气管肺泡灌洗。易做去垂体模型。无扁桃体。

生理功能与行为习性：

1、繁殖快，全年多发情动物。

2、喜啃咬、昼伏夜动。

3、垂体-肾上腺系统功能发达，应激反应灵敏，行为表现多样，情绪敏感，对炎症敏感，眼角膜无血管。（适于作去肾上腺模型和炎症模型，适宜于制作去垂体模型。）

4、视觉、嗅觉较灵敏，适宜做条件反射实验，对许多药物易产生耐药性。（一般开放饲养的大鼠主要死因为呼吸道疾病。）

5、营养缺乏敏感，易产生营养缺乏症。

6、汗腺极不发达，心电图中无S-T段，但其他部分稳定，重复性好。（适宜于直接描记血压，进行降压药及心血管疾病研究，汗腺仅仅分布在爪垫上，尾是散热器官，室温过高时常借助分泌大量唾液调节体温）

7、大鼠血压和血管阻力对药物反应敏感，但对强心甙的作用较猫敏感性低671倍。

8、性情较凶猛，抗病力强，门齿较长，激怒、袭击捕捉时易咬手，对环境适应性强。大鼠的常用品种、品系：

近交系：F344/N、Lou/CN(大鼠回盲部免疫细胞瘤)

突变系：SHR/oal、癫痫大鼠(可用于癫痫病的实验研究)、裸大鼠

封闭群：Wistar大鼠、SD大鼠(多用于营养实验;可作为更年期实验模型,以研究更年期综合征)

大鼠在生物医学研究中的应用：

（一）药理毒理研究1．药效学研究：新药筛选：抗高血压药物的筛选等。雌激素能终止大鼠和小鼠的早期妊娠但不能终止人的妊娠。(2)心血管系统药物的评价：常用作研究心血管药物的药理和调压作用的动物模型。(3)抗炎药物的筛选和评价 ：常用以筛选抗关节炎药和中医痹证的评价。足跖浮肿法 2．药物安全性评价试验

（二）肿瘤研究：大鼠可用于自发性和诱发性肿瘤模型的研究。

（三）微生物、寄生虫的研究

（四）营养代谢研究中的应用

（五）行为学研究的应用：

1、学习、记忆能力的研究

2、药物依赖性研究

3、条件反射和非条件反射的研究

（六）老年病学研究

豚鼠生理功能与行为习性：

1、生殖慢、发育快（豚鼠属于晚成性动物：母鼠怀孕期较长平均68天（60-75天），脑的发育在胚胎期42—45d就已经成熟，出生后就发育完善，（这一点有利于部腹取胎后无菌豚鼠和SPF豚鼠的人工哺育）。出生后就能活动，有牙齿，有被毛，眼可张开，4小时后就能行走和吃软料，2-3天豚鼠就可以一边吃乳，一边吃青饲料，生长发育快。）

2、草食动物：不能合成维生素C3、喜群居，胆小易惊：容易出现脱毛、皮肤损伤和皮炎。

4、豚鼠对青霉素、四环素族、土霉素等药物敏感，易引起变态反应。豚鼠在生物医学研究中的应用

（一）药物研究

1、药效学实验：用豚鼠来研究镇咳药物。是研究抗生素如青霉素的专门动物；作过敏反应的研究，豚鼠是首选动物，最好用白色豚鼠。

（二）、微生物研究中的应用： 豚鼠对结核杆菌具有高度感受性

（三）免疫研究中的应用（速发型过敏反应，迟发型超敏反应）

（四）、耳科研究中的应用：听觉耳动反射

（五）、营养研究中的应用

家兔的生物学特征：回盲部膨大形成一圆小囊，盲肠末端有较长的蚓突，为一免疫器官.对儿茶酚胺类和其它药物反应敏感，颈部有减压神经独立分支，电刺激减压神经对心脏的影响首选家兔。家兔属于刺激性排卵类型动物，兔无明显发情期，雌兔卵巢内一次能成熟许多卵子，但这些卵子并不排出，只有经雄兔的交配刺激后隔10～12小时才能排出。这种现象叫刺激性排卵。哺乳动物中家兔和猫都属于这种类型

能够准确掌握其排卵怀孕的时间，可预测胚胎发育，用于计划生育研究。家兔常用品种品系：日本大耳白兔，新西兰白兔，青紫兰兔，中国白免

家兔在生物医学研究中的应用：发热动物模型（首选家兔）以及解热和检查热原的实验研究，（大鼠、小鼠体温调节不稳定，不宜选用。）兔是研究胆固醇代谢及冠心病最早使用的动物，是复制高胆固醇血症、动脉粥样硬化动物模型的首选动物。生命科学研究中实验动物的选择要求：

一、动物个体间的均一性

二、动物遗传的稳定性

三、动物的易获得性： 果蝇、小鼠易得 选择的原则：

一、选择与人的形态结构、生理机能、代谢特点、疾病特点相似的实验动物

选用小型猪作烧烫伤实验研究是较理想的实验动物；犬、猴适合建立龋齿模型。小型猪是制作中医病理舌苔动物模型最理想的实验动物。金鱼被用来研究视觉器官的结构与功能；药物依赖性试验常选猴（最适宜），妇科方面可用猴做实验。神经反射弧实验蛙为首选的实验动物。可利用家兔进行针灸穴位实质的探讨。犬适合做药理学、营养学、外科学、毒理学、生理学和行为学等研究。小型猪常用于动脉粥样硬化、皮肤病、营养代谢等方面的研究。大鼠适于做应激性胃溃疡等实验。药物代谢的研究最适宜的动物为猴，其次为犬、大鼠。猕猴、豚鼠适宜于做Vc合成代谢的研究。仔猪适宜做营养学和婴儿食谱的研究。SHR大鼠是筛选抗高血压药物的良好动物模型。肥胖症小鼠常用于肥胖症的研究。糖尿病小鼠常用于糖尿病的研究。TA2小鼠常用于乳腺癌的研究。家猪是一种很好的子宫囊肿模型。猫是研究弓形虫的一个很好的实验动物。

二、选择解剖特点、生理特点符合实验目的要求的实验动物

观察电刺激减压神经对心脏的作用时应选用家兔。家兔不需要人工呼吸；青紫蓝兔适用于淋巴结内注射药物或通电进行免疫功能的研究。兔不适于做甲状旁腺摘除实验，但宜做甲状腺摘除后研究甲状旁腺功能的实验。而犬的甲状旁腺位置比较固定，常选用犬作甲状旁腺摘除实验。家兔常用于角膜瘢痕和角膜移植的研究。新西兰兔是很好的青光眼模型；雄鸡适宜做雄性激素的研究。地鼠适于作免疫学、肿瘤学和微循环功能等方面的实验研究。小鼠没有扁桃体，因此不能做扁桃体炎的模型。大鼠没有胆囊，因而不能做胆囊功能的实验研究。大鼠的肝脏再生能力很强，切除60%-70%肝叶仍可再生，很适合做肝外科实验的研究。猫的循环系统发达，故循环系统药物研究首选猫。家犬的汗腺不发达，不宜作发汗实验；其胰腺小，适宜作胰腺摘除术。家犬胃小容易作胃导管手术，便于进行胃肠道生理学的研究。猕猴气管腺数量较多，选用它作慢性支气管炎或祛痰平喘药的研究较合适。不宜选用大鼠、小鼠和豚鼠。可选用成年雌兔或雌猫来诱发排卵进行避孕药和胚胎发育的研究。大、小鼠适宜做卵巢功能的测定，是计划生育、避孕、抗生育、抗着床研究的合适动物。大鼠对营养缺乏比较敏感，是研究营养学的首选动物。家犬是红绿色盲，因此不能以红绿色作为条件刺激物来进行条件反射实验。某些研究高级神经活动的实验可选择家犬作为实验动物。Beagle犬最适用于毒理学、药理学和生理学研究用，比如用于长期毒性实验。大鼠和小鼠的心电图没有S-T段，这在给大鼠作心电图时应加以注意。

三、选择某些品种、品系对实验出现特殊反应的实验动物

家兔常用于解热实验和致热源检查的研究。相反，大、小鼠体温调节不稳定，就不宜选用。鸽子、家犬、猴和猫适于作呕吐实验。家兔、豚鼠等草食动物呕吐反应不敏感，小鼠和大鼠无呕吐反射，镇吐实验就不宜选用。大鼠适于做应激反应和内分泌实验。大鼠可用于降压药的研究。大鼠适合于各种关节炎和中医痹证的研究。家兔、鸡、鸽和猴适于进行动脉粥样硬化实验研究。小鼠、大鼠和犬就不容易形成动脉粥样硬化病变，因此不宜选用。金黄地鼠和豚鼠对各型钩端螺旋体都很敏感，小鼠、大鼠等实验动物对钩端螺旋体一般不大敏感。豚鼠适于作平喘实验、过敏试验和抗组胺药物的研究。豚鼠适于做听觉方面的实验研究。豚鼠对青霉素很敏感。吗啡对大鼠、犬、兔、猴和人主要表现为中枢抑制，对猫表现为中枢兴奋。5-羟色胺对人主要是升压作用，对猫和大鼠则主要是降压作用。普鲁卡因局部注射时，对于人产生局部麻醉作用，对马产生中枢兴奋作用。雌激素能终止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能终止人的妊娠。

四、选择人兽共患病实验动物或人类疾病模型的动物

1、选择人兽共患病实验动物

猴是人类痢疾和结核理想的模型。豚鼠、C57BL小鼠可用作结核病的动物模型。淋巴细胞性脉络丛脑膜炎的研究可选用大鼠和小鼠。流行性出血热的研究宜选用大鼠。沙门氏菌病宜选用豚鼠、大鼠、小鼠、兔、猴。

2、选择人类疾病模型的动物

选择人类疾病模型的动物；中医证候动物模型及病证结合动物模型

五、选择遗传稳定、背景明确、标准化的实验动物

六、选择与实验要求一致的动物规格

1、年龄、体重

2、性别

3、生理状态

第三篇：实验动物学实验报告

实验动物学实验报告

一、实验动物：小鼠

二、操作流程：抓取，固定，编号，给药，取血，麻醉，绝育，解剖。

三、具体操作

1、抓取：抓取小鼠时，右手抓住小鼠尾巴，不要过于用力，以免惊吓小鼠。左手从小鼠身体后部向前抓（以免小鼠向后缩咬伤自己），抓住小鼠颈部。固定住小鼠后，将小鼠皮肤往上抓，尽量将小鼠背部皮肤抓住。左手将小鼠腹部朝向自己，把小鼠尾巴用左手无名指和小指夹住，这时小鼠腹部皮肤紧绷，不能动弹。

2、固定： 通常使用固定器进行固定。将固定器拧开后，抓住小鼠尾巴，使其钻入固定器中，再将拧下的固定器部分装好，使小鼠尾部露出，再将可旋转的铁片固定住即可进行后续实验。

3、编号：编号方式有两种：①剪脚趾编号：把小鼠腹面朝上，在下的脚趾从左至右依次编为1~10号，剪10号脚趾加1~9号脚趾依次编为11~19号，在上的脚趾依次编为20,30,40,50,60,70,80,90号，其余编号与11~19号类似。②打耳钉编号：耳钉上均有唯一编号，通过使用耳钉钳将耳钉打在小鼠耳朵上即可。实验时通常使用的是第一种方式进行编号，第二种编号通常用于需要长距离运输的动物。

4、给药：常用的给药方式有：

①口服给药：即灌胃。将注射器装入药物溶液，装上灌胃针（灌胃针有直头和弯头两种，区别不大）。如上所述，抓取小鼠后，使其头部朝上，尽量呈一直线，取灌胃针，从小鼠嘴角一侧缓缓插入（保持刻度在自己能看到的位置），顺着小鼠口腔食道的弧度让小鼠将针咽入，灌胃过程中如果遇到阻碍一定要及时拔出灌胃针，不可强行灌胃以免伤及小鼠食道以及肺部。灌胃针顺利进入后基本与小鼠身体呈一条直线，注入适量体积后再顺着食道缓缓取出灌胃针。

②静脉注射：小鼠尾部有3条静脉和1条动脉，3条静脉非别位于背部，及两侧。静脉注射时一般选取两侧静脉，因为其相对于背部静脉更为清晰饱满。将小鼠固定后，用酒精擦拭其尾部静脉，使其充血，以便注射。之后使注射器针孔处朝上，针与尾部呈约30°扎入尾部后向上轻挑，再向内扎入部分，此过程应该比较顺畅，没有阻碍，若阻碍较大则有可能扎入到了皮肤中。扎入后将活塞向后回抽一点可见到有血回流，则说明成功扎入静脉当中，注射适当体积后迅速拔针，用酒精进行消毒。

5、取血：有断尾取血法和眼眶取血法两种。本次实验使用的是眼眶取血法。抓取小鼠，固定其头部用手指将其上下眼睑分开，露出其眼球并且不能闭上。用玻璃毛细管从其上眼角处扎入眼球后方毛细血管从，使血液顺着毛细管留下，取血完成后快速将毛细管取下。

6、麻醉：抓取老鼠，使其头部朝下，使其腹部脏器向胸腔靠拢，露出腹部空腔，以免刺伤脏器。将注射器竖直扎入靠近后腿部腹腔，刺入之后稍微向前倾斜但不要向前刺入，一般注入0.5mL麻醉剂即可。随后拔出针，方向小鼠，等待几分钟后即可麻醉。

7、绝育：绝育手术是通过剪除雌鼠卵巢或雄鼠输精管来实现的。将麻醉的雌鼠背面朝上，从其胸腔和尾部之间向下三分之一处剪开一个小口，用镊子将其卵巢取出，上面呈现红色斑点的部分即为卵巢，用剪刀将这一部分剪除，然后用缝合针线将其缝合，缝合方法为将针穿过后，将线缠绕镊子两圈再逆时针缠绕两圈，再重复缠绕一遍，将镊子夹住线头把缠绕的线移至线头系紧即可（缝合过程全程用镊子和剪刀操作），里面肌肉层以及外面皮层均需缝合。雄鼠则从外生殖器向上1-2cm处剪开小口，用镊子在其中找出输精管（较细长的乳白色小管），尽量多减掉一些，以免其长长愈合，以上述方法缝合伤口即可。

9、解剖：以颈椎脱臼法处死小鼠，使其腹面朝上。用镊子将其腹部皮肤夹起，然后用剪刀剪开，观察各个器官所在位置和形态，解剖完的小鼠放入尸体袋中。

第四篇：实验动物学实验

实验一 常用实验动物技术介绍

目的

了解并熟悉实验动物实验操作的基本方法和技术。内容

注射方法；麻醉方法；动物编号的方法；采血；动物性别鉴定；动物的致死。学习打结、缝合、固定动物等。播放录像《太行山猕猴》、《动物的捉拿和给药途径》。用品

大白鼠、小白鼠、蟾蜍、家兔，常用手术器械、注射器、小木锤、大小鼠固定器，戊巴比妥钠，乙醚、士的宁、乙醚、氯仿、氯化钾、一氧化碳、二氧化碳

常用实验动物性别鉴定

1、大、小鼠的性别鉴定

离乳仔鼠性别鉴定主要以生殖器与肛门之间的距离长短及肛门与生殖器有无被毛为标志。识别要点是：① 雄性的生殖器与肛门之间的距离较远，雌鼠较近；② 雄性的生殖器与肛门之间有毛；③ 雄性的生殖器突起较雌鼠大；④ 雌鼠乳头较雄鼠明显。成熟后，雄性可见阴囊,雌性乳头明显而易于区分。

2、豚鼠的性别鉴定

豚鼠的性别鉴定主要是通过生殖器形态来判断。雌性外生殖器阴蒂突起比较小，用拇指按住阴蒂突起，余指拨开大阴唇的皱褶，可见阴道口呈”V”形（注意发情间期的闭锁现象，即一种除了发情和分娩时外，关闭阴道口的细胞结构）；雄性外生殖器有包皮覆盖的阴茎小隆起，用拇指按住其基部包皮，可见龟头向外突出。

3、兔子的性别鉴定

幼兔的性别鉴定主要以尿道开口部与肛门之间的距离及尿道开口部的形状来判别。哺乳期仔兔，雄性尿道开口部与肛门之间的距离较远，为雌性的1.5－2倍，雌性较近。雌性尿道开口扁形，大小与肛门同；雄性圆形，略小于肛门。1月龄仔兔，雄性生殖孔呈圆形，翻出可见呈圆柱体的突起；雌性生殖孔呈Y形，翻出仅见有裂缝，裂缝及于肛门。3月龄以上成年兔，雄性阴囊明显而雌性无阴囊；雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。

4、猫的性别鉴定

幼猫的性别是根据生殖器与肛门的距离来判断。距离远者为雄性，距离近者为雌性。

5、猴类的性别鉴定

猴类性别的区分较为困难。首先检查尿道开口，许多雌性动物有较大的阴蒂，其腹侧形成沟状通向尿道口，而雄性动物的尿道开口在阴茎头上。触摸阴囊内是否有睾丸是确定其雌雄的最可靠办法。

常用实验动物处死

大鼠和小鼠的处死方法

1、脊椎脱臼法

右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头，将脊髓 与脑髓拉断，鼠便立即死亡。

2、断头法

实验者戴上棉纱手套，用右手握住大鼠头部，左手握住背部，露出颈部，助手用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉。小鼠处死法相同。

3、击打法

右手抓住鼠尾，提起，用力摔击其头部，鼠痉挛后立即死亡。用小木锤用力击打鼠头部也可致死。

4、急性大失血法

可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使大小鼠立即死亡。

5、化学致死法

吸入一氧化碳，大、小鼠在一氧化碳浓度为0.2-0.5%环境中即可致死。皮下注射士的宁，吸入乙醚、氯仿，均可致死。士的宁注射量，小鼠为0.76～2.0mg/kg体重，大鼠3.0-3.5ml/kg体重。氯化钾处死大鼠剂量：25%溶液0.6ml/只静脉注入。

实验动物的处死方法很多，应根据动物实验目的、实验动物品种（品系）、以及需要采集标本的部位等因素，选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法，都应遵循安乐死的原则。安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下，使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动物时应注意，首先要保证实验人员的安全；其次要确认实验动物已经死亡，通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察，对死亡作出综合判断；再者要注意环保，避免污染环境，还要妥善处理好尸体。

一、颈椎脱臼处死法

此法是将实验动物的颈椎脱臼，断离脊髓致死，为大、小鼠最常用的处死方法。操作时实验人员用右手抓住鼠尾根部并将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，用左手拇指、食指用力向下按压鼠头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离，实验动物立即死亡。

二、断头处死法

此法适用于鼠类等较小的实验动物。操作时，实验人员用左手按住实验动物的背部，拇指夹住实验动物右腋窝，食指和中指夹住左前肢，右手用剪刀在鼠颈部垂直将鼠头剪断，使实验动物因脑脊髓断离且大量出血死亡。

三、击打头盖骨处死法

主要用于豚鼠和兔的处死。操作时抓住实验动物尾部并提起，用木锤等硬物猛烈打击实验动物头部，使大脑中枢遭到破坏，实验动物痉挛并死亡。

四、放血处死法

此法适用于各种实验动物。具体做法是将实验动物的股动脉、颈动脉、腹主动脉剪断或剪破、刺穿实验动物的心脏放血，导致急性大出血、休克、死亡。

犬、猴等大动物应在轻度麻醉状态下，在股三角做横切口，将股动脉、股静脉全部暴露并切断，让血液流出。操作时用自来水不断冲洗切口及血液，既可保持血液畅流无阻，又可保持操作台清洁，使实验动物急性大出血死亡。

五、空气栓塞处死法

处死兔、猫、犬常用此法。向实验动物静脉内注入一定量的空气，形成肺动脉或冠状动脉空气栓塞，或导致心腔内充满气泡，心脏收缩时气泡变小，心脏舒张时气泡变大，从而影响回心血液量和心输出量，引起循环障碍、休克、死亡。空气栓塞处死法注入的空气量，猫和兔为20~50ml，犬为90~160ml。

六、过量麻醉处死法

此法多用于处死豚鼠和家兔。快速过量注射非挥发性麻醉药（投药量为深麻醉时的30倍），或让动物吸入过量的乙醚，使实验动物中枢神经经过过度抑制，导致死亡。应用戊巴比妥钠注射麻醉致死。豚鼠可用其麻醉剂量3倍以上剂量腹腔注射。猫可采用本药麻醉量的2～3倍药量静脉注射或腹腔内注射。兔可用本药80～100ml／kg的剂量急速注入耳缘静脉内。狗可用本药100mg／kg静脉注射。

七、毒气处死法

让实验动物吸入大量CO2等气体而中毒死亡。吸入二氧化碳，此法安全、人道、迅速，被认为是处理啮齿类的理想方法，国外现多采用此法。可将多只动物同时置入一个大箱或塑料袋内，然后充入CO2，动物在充满CO2的容器内l～3min内死去。

人类为什么总拿小白鼠做实验？

原因一：

老鼠中的小白鼠的基因序列和人类的差不多，一些医学的科研和临床实验都是有小白鼠来完成的。当中以小白鼠做遗传学实验很好，因为它的全基因组和人类的相似度极高，很多人类难以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性状，从而加以实验发现治病基因。

原因二：

实验专用白鼠的生物学意义较大，纯系小鼠的培育方法经过百年探索已经形成固定流程，培育出的小鼠几乎完全没有个体差异(生理上)，而在一般的自然种群中,同种动物间的个体差异是很大的(尽管外表相同)，主要表现在先天的身体素质上。生理上没有个体差异是否意味着气质上没有差异尚不明了，不过选择纯系实验白鼠主要还是为了尽可能的减少先天的个体差异。

原因三：

数量充足，许多实验需要统计学分析，这就要求一定的数量，大白鼠和小白鼠，特别是小白鼠，在人工繁殖条件下，能满足这一要求。种系纯，好的实验要对实验动物的品种严格控制，这用小白鼠就容易解决。

还有动物等级，小白鼠好歹也是哺乳动物，除了体形小，与其它哺乳动物的进化水平相比并不差。体形小反而成为人工繁殖喂养的有利条件。

原因四：

其实很多实验用猩猩等与人更近似的动物做最好，但使用猩猩太昂贵了。许多实验，比如认知类的，实验结束后时需要将动物杀死，来检查其内部变化的。这样，大量的实验肯定就不能用比较“贵重”的猩猩了。

实验

二、常用实验动物采血、血细胞计数

1、小白鼠的采血 目的：

了解并熟悉小白鼠的采血方法； 掌握小白鼠眼眶后静脉丛采血。

用品: 二甲苯棉球、1%肝素溶液、1%可卡因、乙醚、刀片、无钩弯镊子、弯止血钳、微量采血针、剪刀、剪毛剪、锋利刀片、注射器。内容：

1、剪尾采血：需血量少时可用此方法。将动物固定，显露尾部，将尾尖剪去约5mm，从尾根部向尾端部按摩，血即从断端流出。若用二甲苯棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血，但注意二甲苯可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml，大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。

2、摘眼球采血：此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活，可采另一侧眼球取血。

3、眼眶后静脉丛采血：用7—10cm长的微量采血针。将取血管浸入1%肝素溶液，干燥后使用。采血时，左手拇指和食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并用中指配合，轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。可用少量1%可卡因滴入动物眼内，使眼部局部麻醉。右手持取血管，将其尖端插入内眼角与眼球之间，轻轻向眼底方向刺入，小鼠刺入约2—3mm，大鼠刺入约4—5 mm，当感到有阻力时即停止刺入，旋转取血管以切开静脉丛，血液即流入取血管中，采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。用本法短期内可重复采血。小鼠一次可采血0.2—0.3 ml，大鼠一次可采0.5—0.1ml。

4、颈静脉或颈动脉采血：将鼠麻醉，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。

5、断头采血：操作者左手拇指和食指握住鼠颈部，头朝下，用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部，提起动物，血液即可流入准备好的容器中。

6、心脏采血：将动物麻醉，使其仰位固定，剪去胸前区毛，消毒皮肤，在左侧第3—4肋间选择心博最强处穿刺，血液借心脏跳动的力量进入注射器。亦可在动物麻醉后，切开动物胸腔，直视心脏内抽血或剪破心脏，直接用注射器、吸管等吸血。

2、豚鼠的采血 目的

了解并熟悉豚鼠的采血方法； 用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、20%的柠檬酸钠溶液、纱布、脱脂棉。

方法与步骤：

1、耳缘切口采血：先将豚鼠耳消毒，用刀片割破耳缘，在切口边缘涂上20%的柠檬酸钠溶液，防止血凝，则血可自切口处流出。此法采血每次可采0.5ml左右。

2、背中足静脉采血：固定豚鼠，将其右或左后肢膝关节伸直，脚背消